HROG17 T1 M1
Cell line · Product number 300875
HROG17 T1 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from a tumor specimen resected from an adult patient diagnosed with WH...
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01General information
- Description
HROG17 T1 M1 是一株源自成人患者切除腫瘤標本所建立的人類原發性多形性膠質母細胞瘤（GBM）細胞系，該患者經診斷為世界衛生組織（WHO）第四級膠質母細胞瘤。 「T1」的標示表示該樣本取自首次手術時點，而「M1」則代表由此腫瘤衍生的對應體外模型。 該細胞系是在 HROG（漢薩城市羅斯托克膠質瘤）平台內建立的，該平台專注於建立能保留患者特異性分子和表型特徵的超低傳代次數膠質瘤培養物。
HROG17 T1 M1 在標準培養條件下呈貼壁生長，並展現出原發性膠質母細胞瘤培養物典型的成纖維細胞樣形態。 對 HROG 衍生細胞系的免疫表型分析顯示，其表達與膠質及神經譜系相關的標記物，例如膠質纖維酸性蛋白（GFAP）、內斯汀（nestin）和維曼汀（vimentin），這與其源自高階星形細胞瘤的特性一致。 HROG 樣本庫內的分子分析包含對臨床相關參數的評估，例如 MGMT 啟動子甲基化、EGFR 擴增狀態，以及 TP53、IDH1/2、KRAS 和 BRAF 等關鍵基因的突變分析，這些結果均證實了培養過程中保留了腫瘤特異性基因組改變。
HROG17 T1 M1 已被用於評估膠質母細胞瘤對標準治療藥物的敏感性，包括烷化類化療藥物及其他標靶化合物。跨 HROG 模型的比較分析顯示，低傳代數的培養物在早期傳代過程中能維持穩定的形態、生長動力學及藥物反應特徵。 作為一種源自患者、低傳代數的膠質母細胞瘤模型，HROG17 T1 M1 提供了一個具臨床相關性的體外平台，用於研究高階膠質瘤的腫瘤生物學、治療反應及腫瘤間異質性。
- Tissue
- 大腦
- Disease
- 膠質母細胞瘤
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HROG17 T1 M1（Cytion 型號 300875）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FQ
04Handling and culture
- Culture medium
- DMEM：Ham's F12（1:1），重量比：3.1 g/L 葡萄糖，重量比：2.5 mM L-谷氨酰胺，重量比：15 mM HEPES， w: 0.5 mM 丙酮酸鈉，w: 1.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820400a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- TrypLE Express，37°C，10 分鐘，
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用 50% 基礎培養基 + 40% 胎牛血清 (FBS) + 10% 二甲基亞砜 (DMSO)，或 CM-1（Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提高細胞存活率並減輕冷凍引起的應激。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
06Donor
- Donor age
- 70年
- Ethnicity
- 高加索人
07Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Third-party agreements apply
- Yes