KGN

La lignée cellulaire KGN est une lignée de cellules tumorales de la granulosa ovarienne humaine, dérivée d’une patiente atteinte d’un cancer de l’ovaire et immortalisée en vue de son utilisation dans diverses études de recherche. Elle conserve les caractéristiques fonctionnelles des cellules de la granulosa, notamment la synthèse hormonale, ce qui en fait un modèle précieux pour l’étude des fonctions des cellules de la granulosa, de la régulation hormonale et de la pathologie ovarienne. Les cellules KGN ont été utilisées pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents aux troubles de la reproduction et du système endocrinien, tels que le syndrome des ovaires polykystiques (SOPK). Elles se distinguent notamment par leur réponse aux acides gras polyinsaturés comme l’acide arachidonique (AA), qui peut induire un stress oxydatif (SO) et altérer la fonction mitochondriale.

Des recherches ont montré que l’exposition à l’AA dans les cellules KGN augmente les niveaux de marqueurs oxydatifs tels que les espèces réactives de l’oxygène (ERO) et le malondialdéhyde (MDA), réduit la capacité antioxydante totale et altère l’activité mitochondriale, ce qui conduit à l’apoptose cellulaire. Ce processus est associé à la régulation à la hausse du facteur de croissance et de différenciation 15 (GDF15), qui semble jouer un rôle protecteur contre les dommages cellulaires induits par le stress oxydatif. De plus, les cellules KGN sont sensibles à la ferroptose, une forme de mort cellulaire dépendante du fer caractérisée par la peroxydation lipidique et le stress oxydatif. Des études soulignent que l’absorption du fer médiée par le récepteur de la transferrine peut favoriser la production de ROS et contribuer à cette voie.

De plus, les cellules KGN ont été utilisées pour étudier l’impact des microARN sur la fonction cellulaire, le miR-93-5p ayant été identifié comme un facteur favorisant l’apoptose et la ferroptose par l’intermédiaire de la voie de signalisation NF-κB, établissant ainsi un lien entre la régulation des microARN et le dysfonctionnement des cellules de la granulosa dans le SOPK. Ces propriétés font des cellules KGN un modèle important pour approfondir la compréhension de la physiopathologie ovarienne et explorer des cibles thérapeutiques potentielles.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.