Skip to content
KGN
Tissue
Buồng trứng, nang buồng trứng, lớp tế bào granulosa
Disease
U nang tế bào granulosa buồng trứng

Documents

KGN

Cell line · Product number 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00excl. tax and shipping
Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào KGN là dòng tế bào u nang buồng trứng của người, được phân lập từ một bệnh nhân bị ung thư buồng trứng và được bất tử hóa để sử dụng trong các nghiên cứu khoa học. Dòng tế bào này duy trì các đặc tính chức năng của tế bào nang buồng trứng, bao gồm tổng hợp hormone, khiến nó trở thành một mô hình quý giá để nghiên cứu chức năng của tế bào nang buồng trứng, điều hòa hormone và bệnh lý buồng trứng. Tế bào KGN đã được sử dụng để nghiên cứu các cơ chế phân tử liên quan đến các rối loạn sinh sản và nội tiết như hội chứng buồng trứng đa nang (PCOS). Chúng đặc biệt được chú ý vì phản ứng với các axit béo không bão hòa đa như axit arachidonic (AA), có thể gây stress oxy hóa (OS) và ảnh hưởng đến chức năng ty thể.

Nghiên cứu cho thấy việc tiếp xúc với AA trong tế bào KGN làm tăng mức độ các dấu hiệu oxy hóa như các loại oxy phản ứng (ROS) và malondialdehyde (MDA), giảm khả năng chống oxy hóa tổng thể và làm suy giảm hoạt động của ty thể, dẫn đến apoptosis tế bào. Quá trình này liên quan đến sự tăng biểu hiện của yếu tố phân biệt tăng trưởng 15 (GDF15), dường như có vai trò bảo vệ chống lại tổn thương tế bào do stress oxy hóa gây ra. Ngoài ra, tế bào KGN nhạy cảm với ferroptosis, một dạng chết tế bào phụ thuộc vào sắt, đặc trưng bởi quá trình peroxidation lipid và stress oxy hóa. Các nghiên cứu chỉ ra rằng việc hấp thu sắt thông qua thụ thể transferrin có thể thúc đẩy sản xuất ROS và góp phần vào con đường này.

Hơn nữa, tế bào KGN đã được sử dụng để nghiên cứu tác động của microRNA đối với chức năng tế bào, vì miR-93-5p đã được xác định là yếu tố thúc đẩy apoptosis và ferroptosis thông qua con đường tín hiệu NF-κB, liên kết điều hòa microRNA với rối loạn chức năng tế bào granulosa trong hội chứng buồng trứng đa nang (PCOS). Những khả năng này khiến tế bào KGN trở thành mô hình quan trọng để nâng cao hiểu biết về sinh lý bệnh buồng trứng và khám phá các mục tiêu điều trị tiềm năng.

Tissue
Buồng trứng, nang buồng trứng, lớp tế bào granulosa
Disease
U nang tế bào granulosa buồng trứng

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast

04Identifiers

Citation
KGN (Số catalog Cytion 305446)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Biến dị: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), dị hợp tử

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
63 năm
Ethnicity
Nhật Bản