KGN

A linhagem celular KGN é uma linhagem de células tumorais da granulosa ovariana humana, derivada de uma paciente com câncer de ovário e imortalizada para uso em diversos estudos de pesquisa. Ela mantém as características funcionais das células da granulosa, incluindo a síntese hormonal, o que a torna um modelo valioso para o estudo das funções das células da granulosa, da regulação hormonal e da patologia ovariana. As células KGN têm sido utilizadas para investigar os mecanismos moleculares subjacentes a distúrbios reprodutivos e endócrinos, como a síndrome dos ovários policísticos (SOP). Elas são particularmente conhecidas por sua resposta a ácidos graxos poliinsaturados, como o ácido araquidônico (AA), que pode induzir estresse oxidativo (EO) e afetar a função mitocondrial.

Pesquisas demonstraram que a exposição ao AA nas células KGN eleva os níveis de marcadores oxidativos, como espécies reativas de oxigênio (ROS) e malondialdeído (MDA), reduz a capacidade antioxidante total e prejudica a atividade mitocondrial, levando à apoptose celular. Esse processo está associado à regulação positiva do fator de crescimento e diferenciação 15 (GDF15), que parece desempenhar um papel protetor contra danos celulares induzidos pelo estresse oxidativo. Além disso, as células KGN são sensíveis à ferroptose, uma forma de morte celular dependente de ferro caracterizada pela peroxidação lipídica e pelo estresse oxidativo. Estudos destacam que a captação de ferro mediada pelo receptor de transferrina pode promover a produção de ROS e contribuir para essa via.

Além disso, as células KGN têm sido utilizadas para estudar o impacto dos microRNAs na função celular, uma vez que o miR-93-5p foi identificado como um fator que promove a apoptose e a ferroptose por meio da via de sinalização NF-κB, relacionando a regulação dos miRNAs à disfunção das células da granulosa na SOP. Essas capacidades tornam as células KGN um modelo significativo para aprofundar a compreensão da fisiopatologia ovariana e explorar possíveis alvos terapêuticos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.