KGN
Cell line · Product number 305446
The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...
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01General information
- Description
KGN 細胞系是一種源自卵巢癌患者的人類卵巢顆粒層腫瘤細胞系,經永生化處理後可用於各項研究。該細胞系保留了顆粒層細胞的功能特徵,包括激素合成能力,因此成為研究顆粒層細胞功能、激素調控及卵巢病理學的寶貴模型。 KGN 細胞已被用於探究多囊卵巢綜合症(PCOS)等生殖與內分泌疾病背後的分子機制。該細胞特別以對花生四烯酸(AA)等多不飽和脂肪酸的反應而著稱,此類脂肪酸可能誘發氧化壓力(OS)並影響線粒體功能。
研究顯示,KGN細胞暴露於AA會升高活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)等氧化標記物的水平,降低總抗氧化能力,並損害線粒體活性,最終導致細胞凋亡。 此過程與生長分化因子 15(GDF15)的上調有關,該因子似乎在抵禦氧化壓力所誘發的細胞損傷方面發揮保護作用。此外,KGN 細胞對鐵死亡(ferroptosis)較為敏感,這是一種以脂質過氧化和氧化壓力為特徵的鐵依賴性細胞死亡形式。 研究指出,透過轉鐵蛋白受體介導的鐵攝取可促進活性氧(ROS)的產生,並參與此途徑。
此外,KGN 細胞已被用於研究微小 RNA(microRNA)對細胞功能的影響,因為已確認 miR-93-5p 是一種透過 NF-κB 訊號傳導路徑促進凋亡和鐵死亡的因子,從而將 miRNA 調控與多囊性卵巢綜合症(PCOS)中的顆粒細胞功能障礙聯繫起來。 這些特性使 KGN 細胞成為深入理解卵巢病理生理學及探索潛在治療標靶的重要模型。
- Tissue
- 卵巢、卵泡、顆粒細胞層
- Disease
- 卵巢顆粒細胞瘤
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纖維細胞樣
04Identifiers
- Citation
- KGN(Cytion 型號 305446)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0375
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- 突變:FOXL2,p.Cys134Trp (c.402C>G),雜合子
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨酰胺,重量比:15 mM HEPES, w: 0.5 mM 丙酮酸鈉,w: 1.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 63年
- Ethnicity
- 日文
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
