Skip to content
KGN
Tissue
שחלה, זקיק שחלה, שכבת תאי גרנולוזה
Disease
גידול תאי גרנולוזה בשחלה

Documents

KGN

Cell line · Product number 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

US$395.00excl. tax and shipping
Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים KGN הוא קו תאים של גידול גרנולוזה בשחלה אנושית, שמקורו בחולה בסרטן השחלה והונצח לשימוש במחקרים שונים. הוא שומר על המאפיינים התפקודיים של תאי גרנולוזה, כולל סינתזת הורמונים, מה שהופך אותו למודל חשוב לבחינת תפקודי תאי גרנולוזה, ויסות הורמונלי ופתולוגיה של השחלה. תאי KGN שימשו לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס הפרעות רבייה והפרעות אנדוקריניות כגון תסמונת השחלות הפוליציסטיות (PCOS). הם ידועים במיוחד בתגובתם לחומצות שומן רב-בלתי-רוויות כגון חומצה אראצ'ידונית (AA), העלולות לגרום לעקה חמצונית (OS) ולהשפיע על תפקוד המיטוכונדריה.

מחקרים הראו כי חשיפה ל-AA בתאי KGN מעלה את רמות הסמנים החמצוניים, כגון מינים פעילים של חמצן (ROS) ומלונדיאלדהיד (MDA), מפחיתה את היכולת האנטי-חמצונית הכוללת ופוגעת בפעילות המיטוכונדריאלית, מה שמוביל לאפופטוזיס של התאים. תהליך זה קשור לעלייה ברגולציה של גורם הבחנה בגדילה 15 (GDF15), שנראה כי הוא ממלא תפקיד מגן מפני נזק תאי הנגרם על ידי לחץ חמצוני. בנוסף, תאי KGN רגישים לפרופטוזיס, צורה של מוות תאי התלויה בברזל המאופיינת בחמצון שומנים ובסטרס חמצוני. מחקרים מדגישים כי ספיגת ברזל המתווכת על ידי קולטן הטרנספרין יכולה לקדם ייצור ROS ולתרום למסלול זה.

יתר על כן, תאי KGN שימשו לחקר ההשפעה של מיקרו-רנ"א על תפקוד התאים, שכן miR-93-5p זוהה כגורם המקדם אפופטוזיס ופרופטוזיס באמצעות מסלול האיתות NF-κB, המקשר בין ויסות miRNA לתפקוד לקוי של תאי גרנולוזה ב-PCOS. יכולות אלה הופכות את תאי KGN למודל משמעותי לקידום ההבנה של הפתופיזיולוגיה השחלתית ולחקר מטרות טיפוליות פוטנציאליות.

Tissue
שחלה, זקיק שחלה, שכבת תאי גרנולוזה
Disease
גידול תאי גרנולוזה בשחלה

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט

04Identifiers

Citation
KGN (מספר קטלוגי Cytion 305446)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), הטרוזיגוטי

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
פעמיים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
63 שנים
Ethnicity
יפנית