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MMQ
Tissue
Cerveau
Disease
Néoplasme de l'hypophyse chez le rat

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MMQ

Cell line · Product number 300498

The MMQ cell line is a clonal, prolactin-secreting cell line derived from the 7315a rat pituitary tumor. It exclusively secretes prolactin and expresses f...

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1

01General information

Description

La lignée cellulaire MMQ est une lignée clonale sécrétrice de prolactine dérivée de la tumeur hypophysaire de rat 7315a. Elle sécrète exclusivement de la prolactine et exprime des récepteurs fonctionnels de la dopamine, plus précisément du sous-type D2. La dopamine inhibe la libération de prolactine (PRL) en réduisant les concentrations intracellulaires d’AMP cyclique (AMPc) et l’absorption du calcium, comme l’ont démontré diverses expériences. Cette inhibition est inversée par l’halopéridol et la toxine pertussique, ce qui confirme le rôle des protéines liant le GTP dans l’action de la dopamine. Les cellules MMQ réagissent également à la somatostatine (SRIF) et au polypeptide intestinal vasoactif (VIP), mais pas à la TRH, à l’angiotensine II ni à la neurotensine.

Les cellules MMQ prolifèrent rapidement, leur nombre doublant en moins de 24 heures dans des conditions optimales. Lorsqu’elles sont transplantées chez le rat, les cellules MMQ forment des tumeurs qui augmentent les taux sériques de prolactine sans modifier d’autres hormones telles que l’ACTH. Cette lignée cellulaire constitue un modèle important pour l’étude de la régulation de la prolactine, en particulier en ce qui concerne la dopamine et ses mécanismes d’inhibition de la sécrétion de prolactine.

Tissue
Cerveau
Disease
Néoplasme de l'hypophyse chez le rat
Applications
Culture cellulaire en 3D

02Classification

Organism
Rat
Sex
Unspecified
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Cellules sphéroïdales
Karyotype
Caryotype hyperdiploïde du rat présentant une polyploïdie de 6 % - 49-52<2n> - taux élevé de cassures spontanées

04Identifiers

Citation
MMQ (numéro de catalogue Cytion 300498)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_2117

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Dopamine
Viruses
SMRV-
Products
Prolactine

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 7,5 % de sérum de cheval et 2,5 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur
Subculturing
Entretenir les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu de culture. Démarrer les cultures à une densité de 5 × 10⁵ cellules/ml et maintenir la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 × 10⁵ et 1 × 10⁶ cellules/ml pour une croissance optimale.
Seeding density
> 2 × 10⁵ cellules/ml
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
5 jours