Siirry sisältöön
MMQ
Kudos
Aivot
Sairaus
Rotan aivolisäkkeen kasvain

Asiakirjat

MMQ

Cell line · Tuotenumero 300498

The MMQ cell line is a clonal, prolactin-secreting cell line derived from the 7315a rat pituitary tumor. It exclusively secretes prolactin and expresses f...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa vähän
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MMQ-solulinja on klonaalinen, prolaktiinia erittävä solulinja, joka on peräisin rotan 7315a-aivolisäkekasvaimesta. Se erittää yksinomaan prolaktiinia ja ilmentää toiminnallisia dopamiinireseptoreita, erityisesti D2-alatyyppiä. Dopamiini estää prolaktiinin (PRL) vapautumista vähentämällä solunsisäisiä syklisen AMP:n (cAMP) tasoja ja kalsiumin ottoa, kuten eri kokeissa on osoitettu. Haloperidoli ja hinkuyskätoksiini kumoavat tämän eston, mikä vahvistaa GTP:tä sitovien proteiinien roolin dopamiinin vaikutuksessa. MMQ-solut reagoivat myös somatostatiiniin (SRIF) ja vasoaktiiviseen suolistopolypeptidiin (VIP), mutta eivät TRH:hon, angiotensiini II:een tai neurotensiiniin.

MMQ-solut lisääntyvät nopeasti, sillä ne kaksinkertaistuvat alle 24 tunnissa optimaalisissa olosuhteissa. Kun MMQ-solut siirretään rotille, ne muodostavat kasvaimia, jotka nostavat seerumin prolaktiinipitoisuutta muuttamatta muita hormoneja, kuten ACTH:ta. Tämä solulinja on tärkeä malli prolaktiinin säätelyn tutkimiseen, erityisesti suhteessa dopamiiniin ja sen prolaktiinin eritystä estäviin mekanismeihin.

Kudos
Aivot
Sairaus
Rotan aivolisäkkeen kasvain
Sovellukset
3D-soluviljely

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pallomaiset solut
Karyotyyppi
Rotan hyperdiploidinen karyotyyppi, jossa 6 % polyploidiaa - 49-52<2n> - suuri määrä spontaaneja rikkoutumisia

04Tunnisteet

Lähdeviite
MMQ (Cytionin luettelonumero 300498)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_2117

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Dopamiini
Virukset
SMRV-
Tuotteet
Prolaktiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 7,5 % hevosseerumilla, 2,5 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Kylvötiheys
> 2 x 105 solua/ml
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
5 päivää