
- Tissue
- ריאה
- Disease
- גידול לא מובחן בחזה עם חוסר SMARCA4
- Synonyms
- DMS-114, DMS114, Darmouth Medical School 114
Documents
01General information
- Description
DMS-114 הוא קו תאים של סרטן ריאות תאים קטנים (SCLC) בבני אדם, בעל מאפיינים ייחודיים המבדילים אותו מתתי-סוגים אחרים של SCLC. מחקרים אחרונים הצביעו על כך ש-DMS-114, שסווג בעבר בקטגוריית SCLC המבטא YAP1 (SCLC-Y), נושא מוטציות פתוגניות ב-SMARCA4, יחידת משנה של ATPase במכלול SWI/SNF המשנה את מבנה הכרומטין. מוטציות אלה קשורות להיעדר מוטציות RB1, בניגוד למאפיין המוטציוני הטיפוסי של SCLC, אשר בדרך כלל כולל שינויים בו-זמניים ב-TP53 וב-RB1. הפרופיל של קו תאים זה כולל ביטוי מופחת של SMARCA4 mRNA וחלבון, מה שתורם לסיווגו מחדש כגידול לא מובחן עם חוסר SMARCA4 (SMARCA4-UT) ולא כ-SCLC מסורתי. הערכות מורפולוגיות הראו כי DMS-114 דומה יותר ל-SMARCA4-UT בחזה, ומציג תכונות כגון ביטוי נמוך יותר של סמן נוירואנדוקריני ופרופיל אימונוהיסטוכימי ייחודי.
הסיווג המעודכן של DMS-114 כגידול ממאיר עם חוסר SMARCA4 ולא כ-SCLC משפיע באופן משמעותי על השימוש בו כמודל פרה-קליני. הוא משמש כמשאב חשוב לחקר אסטרטגיות טיפוליות המכוונות למסלולים הקשורים ל-SMARCA4 ולחקר הביולוגיה של סוגי סרטן בית החזה האגרסיביים הדומים ל-SCLC. בניגוד ל-SCLC קונבנציונלי, גידולים עם חוסר ב-SMARCA4, כולל DMS-114, מתאפיינים לעתים קרובות בפרופילים ייחודיים של ביטוי גנים, המתאפיינים בביטוי גבוה של YAP1, אובדן סמנים נוירואנדוקריניים מסוימים ופגיעות מולקולרית מובהקת. תובנה זו מדגישה את הצורך בניתוח מולקולרי והיסטופתולוגי מקיף לצורך סיווג מדויק של הגידולים ופיתוח אסטרטגיות טיפול יעילות.
- Tissue
- ריאה
- Disease
- גידול לא מובחן בחזה עם חוסר SMARCA4
- Synonyms
- DMS-114
- DMS114
- Darmouth Medical School 114
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
04Identifiers
- Citation
- DMS-114 (מספר קטלוגי Cytion 305364)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1174
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- פקטור גדילה אפידרמלי (EGF), משלים (CR3)
- Protein expression
- גנים שבאים לידי ביטוי: אדרנוקורטיקוטרופין (הורמון אדרנוקורטיקוטרופי, ACTH), בומבסין, גלוקגון, 17 בטא אסטרדיול, אוקסיטוצין - נוירופיזין (OT-NP)
- Antigen expression
- Leu 7 +, My23 +, CD11b +
- Mutational profile
- מוטציה: SMARCA4, p.Glu1310Ter (c.3928G>T), הומוזיגוטי; מוטציה: PARD3B, Ex2-14del, הומוזיגוטי; מוטציה: TP53, p.Arg213Ter (c.637C>T), הומוזיגוטי
06Handling and culture
- Culture medium
- MB 752/1 בינוני של Waymouth (אנו לא מספקים מוצר זה; אנא פנו לספקים אחרים. אנא הודיעו לנו אם אתם זקוקים לעזרה נוספת)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Fluid renewal
- פעמיים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 68 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes