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Células HNO210
Tissue
Laringe
Disease
Carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço (HNSCC)

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Células HNO210

Cell line · Product number 300134

The HNO210 cell line is derived from a laryngeal squamous cell carcinoma, a subtype of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC). This cell line has b...

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1

01General information

Description

A linhagem celular HNO210 é derivada de um carcinoma espinocelular da laringe, um subtipo do carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (HNSCC). Essa linhagem celular foi amplamente caracterizada quanto às suas características genéticas e moleculares, tornando-a um modelo valioso para o estudo da patogênese e das respostas ao tratamento do HNSCC. A análise por hibridização genômica comparativa cromossômica (cCGH) da HNO210 revelou várias aberrações cromossômicas significativas. Notavelmente, ela apresenta ganhos no número de cópias de DNA nas regiões cromossômicas 3q, 7p, 7q, 9p, 9q, 20p e 20q, e perdas no número de cópias em 3p, 4p, 4q e no cromossomo 21. Essas alterações genéticas são comuns no HNSCC e estão associadas a um comportamento tumoral agressivo e a um mau prognóstico para o paciente.

Em particular, a amplificação de regiões como 3q e 11q13, observada em muitas linhagens celulares de HNSCC, é de interesse devido à sua correlação com o aumento da expressão de oncogenes como CCND1 (ciclina D1) e CTTN (cortactina). Esses genes estão envolvidos na regulação do ciclo celular e na organização do citoesqueleto, respectivamente, e sua superexpressão pode contribuir para o aumento da proliferação celular, invasão e metástase. A linhagem celular HNO210, com seu perfil genético distinto, serve como um modelo robusto para investigar os mecanismos moleculares subjacentes à progressão do câncer de laringe e para testar terapias direcionadas que abordem essas anomalias genéticas específicas.

Além disso, essa linha celular faz parte de um painel utilizado para explorar a eficácia de terapias combinadas, como o uso de cisplatina com talidomida, que se mostraram promissoras no aumento da atividade antitumoral in vitro e in vivo. Isso torna a HNO210 não apenas crucial para a pesquisa básica sobre o câncer, mas também para estudos translacionais voltados para a melhoria dos resultados terapêuticos em pacientes com HNSCC.

Tissue
Laringe
Disease
Carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço (HNSCC)

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial

04Identifiers

Citation
HNO210 (número de catálogo da Cytion 300134)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_D215

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

07Donor

Donor age
69 anos
Ethnicity
caucasiano