KMS-12-BM

A linhagem celular KMS-12-BM é uma linhagem de células de mieloma humano estabelecida a partir da medula óssea de um paciente com mieloma múltiplo não produtor. Essa linha celular representa um estágio plasmocitóide imaturo da diferenciação das células B, caracterizado pela expressão dos marcadores de superfície CD20, CD38 e PCA-1, mas pela ausência de produção de imunoglobulinas. As células se destacam por sua morfologia distorcida, sendo que muitas apresentam características multinucleares e gigantes. Do ponto de vista ultraestrutural, as células KMS-12-BM possuem retículo endoplasmático rugoso bem desenvolvido e núcleos ovóides excêntricos com distribuição periférica da cromatina, típica das células plasmocitóides.

As células KMS-12-BM apresentam uma anomalia cromossômica, particularmente uma translocação recíproca t(11;14)(q13;q32), frequentemente associada ao mieloma múltiplo. Essas células também apresentam uma ampla variação no número de cromossomos, desde hipodiplóide até poliplóide, indicando instabilidade genômica significativa. Ao contrário de sua contraparte KMS-12-PE, a linhagem KMS-12-BM não produz amilase e não apresenta secreção nem expressão de imunoglobulina na superfície, tornando-a adequada para estudos envolvendo mieloma não produtor de imunoglobulina. Além disso, ela apresenta baixa eficiência de clonagem em condições de cultura em ágar mole, com menos de 0,1% de formação de colônias, e não possui propriedades tumorigênicas quando injetada em camundongos nude.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.