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LCLC-97TM1
Tissue
Pulmão
Disease
Carcinoma de células grandes
Synonyms
LCLC97TM1

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LCLC-97TM1

Cell line · Product number 300409

The LCLC-97TM1 cell line is derived from a large cell lung carcinoma (LCLC) and was established using a xenograft approach, specifically from the first nu...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

A linhagem celular LCLC-97TM1 é derivada de um carcinoma pulmonar de células grandes (LCLC) e foi estabelecida por meio de uma abordagem de xenoenxerto, especificamente a partir da primeira passagem em camundongo nude de um carcinoma primário de células grandes. Essa linha celular apresenta ilhotas epitelioides densamente agrupadas em cultura, com bordas celulares que são tipicamente indistinguíveis sob exame microscópico padrão. Ao contrário de muitas outras linhas celulares, as culturas de LCLC-97TM1 geralmente não atingem a confluência, o que pode ser atribuído aos seus padrões de crescimento únicos.

Do ponto de vista citológico, as células LCLC-97TM1 são caracterizadas por um núcleo grande, único e redondo, que contém um ou dois nucléolos proeminentes, e um padrão de cromatina uniformemente distribuído. Essa morfologia nuclear é indicativa da natureza agressiva frequentemente associada ao carcinoma pulmonar de células grandes. A linhagem celular também se destaca por ser negativa para PAS (ácido periódico-Schiff) e por não apresentar reatividade à coloração com azul de Alcian, o que é consistente com as características observadas tanto no tumor original quanto no xenoenxerto derivado da linhagem celular.

A análise cromossômica da LCLC-97TM1 revela seu cariótipo complexo, típico dos carcinomas de células grandes, o que sugere uma instabilidade genética significativa. Esse perfil genético, combinado com suas características morfológicas distintas, torna a LCLC-97TM1 um modelo valioso para o estudo da patobiologia do carcinoma pulmonar de células grandes, particularmente no contexto da tumorigênese, metástase e resposta terapêutica no câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC).

Tissue
Pulmão
Disease
Carcinoma de células grandes
Synonyms
  • LCLC97TM1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Sim, em camundongos nude

04Identifiers

Citation
LCLC-97TM1 (número de catálogo da Cytion 300409)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1376

05Expression and susceptibility

Protein expression
Expressão do P53
Reverse transcriptase
Negativo

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 a 3 × 10⁵ células/cm²
Fluid renewal
A cada 3 a 5 dias
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
44 anos
Ethnicity
caucasiano