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HK-ZFN-AURKB-mEGFP 細胞
Tissue
子宮頸內口
Disease
腺癌
Metastatic site
原發性腫瘤部位(子宮頸管內)

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HK-ZFN-AURKB-mEGFP 細胞

Cell line · Product number 300173

The HK-ZFN-AURKB-mEGFP cell line is a genetically engineered human cell model designed to express the AURKB (Aurora Kinase B) protein fused with mEGFP (mo...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

HK-ZFN-AURKB-mEGFP 細胞系是一種經基因工程改造的人類細胞模型,旨在利用鋅指核酸酶(ZFN)技術,表達與 mEGFP(單體增強型綠色螢光蛋白)融合的 AURKB(Aurora 激酶 B)蛋白。 AURKB 是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶,在有絲分裂染色體分離、細胞質分裂以及有絲分裂紡錘檢查點的調控中扮演關鍵角色。 與 mEGFP 的融合使研究人員能夠即時觀察 AURKB 在細胞內的活性與定位,從而深入研究其在細胞分裂過程中的動態行為。

此細胞系對於研究有絲分裂分子機制及 AURKB 特定功能的研究人員而言,是一項強大的工具。整合 mEGFP 後,可進行螢光檢測與活細胞成像,從而深入了解 AURKB 的時空分布。 採用 ZFN 技術可確保精確的基因組整合,並維持 AURKB 表達的忠實度。此模型在癌症研究中尤具價值,因為 AURKB 在癌症中常呈現過度表達,且與腫瘤發生相關,使其成為治療干預的潛在靶點。

Tissue
子宮頸內口
Disease
腺癌
Metastatic site
原發性腫瘤部位(子宮頸管內)
Applications
極光B激酶(AURKB)生物學;有絲分裂激酶成像;染色體分離;紡錘體檢查點;活細胞成像;ZFN基因組編輯驗證;癌症生物學

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the endogenous AURKB locus for mitotic kinase imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
呈馬賽克狀石塊形狀的類上皮細胞
Cell type
上皮細胞

04Identifiers

Citation
HK-ZFN-AURKB-mEGFP(Cytion 型號 300173)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VL13
Depositor
艾倫伯格實驗室(EMBL)

05Expression and susceptibility

Products
EGFP(增強型綠色螢光蛋白)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
30年
Ethnicity
非裔美國人