B-LCL-CDG1
Cell line · Product number 302012
B-LCL-CDG1 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient diagnosed with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG). This...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
B-LCL-CDG1是一种经EBV转化的B淋巴细胞系，来源于一名被诊断患有先天性糖基化障碍（CDG）--PMM2-CDG的患者。这种罕见的代谢紊乱是由*PMM2*基因突变引起的，该基因编码磷酸甘露糖化酶2（PMM2），这是糖基化途径中的一种重要酶。PMM2*基因突变会破坏糖基化寡糖链的合成，导致组织和血液中各种糖蛋白和糖磷脂的糖基化缺陷。这种疾病以多系统表现为特征，通常会影响神经、肝脏和内分泌功能。
B-LCL-CDG1是一种经EBV转化的淋巴母细胞系，它为研究*PMM2*缺乏症的分子和细胞后果提供了一个宝贵的体外模型。这种细胞系可用于研究糖基化缺陷、PMM2 酶活性和潜在的治疗干预，包括基因矫正和底物补充。B-LCL-CDG1以及其他CDG患者衍生细胞系是了解CDG病理生理学和评估这些疾病的新型治疗策略的重要资源。
- Tissue
- 外周血
- Disease
- 先天性糖基化紊乱
- Metastatic site
- 不适用（EBV转化性B细胞淋巴细胞样细胞瘤；无转移）
- Applications
- 免疫细胞中 CDG 作用的基因分型。功能检测（如 B 细胞表面抗原）。细胞毒性药物测试突变分析细胞凋亡机制分析。HLA 类型鉴定。不同细胞糖蛋白的糖基化缺陷对不同功能的影响。
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- 圆形电池
- Cell type
- B 淋巴细胞
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-CDG1（Cytion 目录号 302012）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Expression and susceptibility
- Viruses
- 变形体：EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：2.0 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820700a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS
- Subculturing
- 通过定期添加或更换培养基来维持细胞培养。初始培养时细胞密度应为2×10⁵个细胞/毫升，并保持细胞浓度在1×10⁵至5×10⁵个细胞/毫升范围内以获得最佳生长效果。
- Fluid renewal
- 一旦中等颜色变成黄色
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes