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HEK293-CLDN18.2
Tissue
胎儿肾脏
Disease
转染/永生化;无致瘤性(HEK293背景)

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HEK293-CLDN18.2

Cell line · Product number 305986

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元。
如果您代表商业机构,或不确定应归入哪一类,请 联系我们。


HEK293-CLDN18.2细胞是经过基因工程改造的人胚胎肾293(HEK293)细胞,可稳定表达人类紧密连接蛋白18亚型2(CLDN18.2),这是一种属于紧密连接蛋白家族的紧密连接相关跨膜蛋白。 CLDN18.2是一种胃系特异性亚型,通常仅存在于分化的胃黏膜上皮细胞中,在生理条件下其细胞外域基本不可及。 在恶性转化过程中,上皮极性和紧密连接结构的破坏使 CLDN18.2 暴露在肿瘤细胞表面,导致其在多种癌症中过表达并可被访问,包括胃腺癌、胃食管结合部癌、胰腺癌和其他胃肠道恶性肿瘤。 由于其在正常组织中的分布高度受限且在肿瘤中暴露,CLDN18.2 已成为肿瘤学中一个具有临床重要意义的治疗靶点。

HEK293-CLDN18.2 细胞被广泛用于开发和表征 CLDN18.2 靶向治疗药物,包括单克隆抗体、抗体药物偶联物、双特异性抗体、CAR-T 和 CAR-NK 细胞疗法以及靶向成像剂。 该稳定的重组表达系统可对抗原结合亲和力、表位特异性、受体密度、内化动力学以及靶标依赖性细胞毒性进行定量分析。 这些细胞还常用于流式细胞术检测、报告基因检测、抗体筛选工作流程,以及旨在评估抗体依赖性细胞毒性(ADCC)或补体依赖性细胞毒性(CDC)的免疫效应功能研究。由于 HEK293 细胞支持强效的重组膜蛋白表达和高效增殖,因此为标准化 CLDN18.2 检测方法的开发和治疗验证提供了可靠的平台。

Tissue
胎儿肾脏
Disease
转染/永生化;无致瘤性(HEK293背景)
Applications
CLDN18.2靶向抗体及ADC研发;CAR-T/CAR-NK细胞疗法;ADCC/CDC检测;流式细胞术;胃癌/胃食管结合部癌/胰腺癌治疗药物

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CLDN18.2 expression construct for tight junction antigen studies and targeted cancer therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮样
Cell type
上皮细胞
Doubling time
约24-36小时

04Identifiers

Citation
HEK293-CLDN18.2(Cytion 产品编号 305986)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_E5J2

05Expression and susceptibility

Surface antigens
CLDN18.2
Receptors expressed
CDLN18.2

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中加入10% FBS、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES 和 1% NEAA。加入布拉西定(盐酸布拉西定),使其终浓度达到 5 µg/mL。
Dissociation reagent
胰蛋白酶-EDTA
Subculturing
常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育直至细胞分离(5-10 分钟)。在显微镜下观察分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。
Split ratio
1 到 5
Seeding density
2至4×10⁴个细胞/平方厘米
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Post-thaw recovery

解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并粘附(对于粘附培养物)至少 24 小时。

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Donor age
胎儿