Hep-66.3A

يُشتق خط خلايا الورم الكبدي Hep-66.4A من ورم كبدي لدى الفأر، وتحديداً من سلالة الفأر C57BL/6J. يتميز هذا الخط الخلوي بأصله الكبدي الخلوي الذي تم تأكيده من خلال تحليل البروتين الخيطي الوسيط. ويعبّر Hep-66.4A عن الكيراتين البسيط K8 وK18، وهما نموذجان لخلايا الكبد الطبيعية، بالإضافة إلى الفيمينتين والكيراتين K19 بدرجات متفاوتة. تؤكد هذه الأنماط البروتينية الطبيعة الكبدية لخط الخلايا وتصنيفه كخط كبد.

يُظهر خط الخلايا Hep-66.4A مورفولوجيا طلائية في الغالب، مما يعكس أصله من الخلايا الكبدية. يتوافق هذا النمط الظاهري المورفولوجي مع مظهر تعبير البروتين الخاص به. لم يكشف تحليل بصمة الحمض النووي لخلية Hep-66.4A عن أي تشوهات هيكلية كبيرة، مما يشير إلى درجة من الاستقرار الجيني. ومع ذلك، لوحظت بعض التغييرات في الكثافة النسبية لنطاقات محددة مع زيادة أعداد الممرات، مما يشير إلى وجود تغيرات جينية طفيفة على مدى فترات الاستزراع الممتدة.

على الرغم من عدم وجود طفرات p53 التي يمكن اكتشافها في أورام كبد الفأر الأولية، فقد تم العثور على انحرافات في بعض سلالات أورام الكبد أثناء التكاثر في المختبر. تم تحليل خط خلايا Hep-66.4A بحثًا عن طفرات في جيني p53 و c-Ha-ras. يشير عدم وجود طفرات يمكن اكتشافها في الجين p53 في هذا الخط أثناء الممرات المبكرة إلى وجود خلفية جينية مستقرة. يُستخدم هذا الخط الخلوي كنموذج قيّم لدراسة سرطان الخلايا الكبدية، مما يوفر نظرة ثاقبة للآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء نشوء أورام الكبد.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان