Hep-66.3A

Клітинну лінію гепатоми Hep-66.4A отримано з пухлини печінки миші, а саме зі штаму миші C57BL/6J. Ця клітинна лінія характеризується гепатоцитарним походженням, підтвердженим за допомогою аналізу білка проміжних філаментів. Hep-66.4A експресує прості кератини K8 і K18, які є типовими для нормальних клітин печінки, а також віментин і кератин K19 в різному ступені. Ці білкові патерни підтверджують гепатоцитарну природу клітинної лінії та її класифікацію як лінії гепатоми.

Клітинна лінія Hep-66.4A має переважно епітеліальну морфологію, що відображає її походження з гепатоцитів. Цей морфологічний фенотип узгоджується з профілем експресії білків. Аналіз ДНК-відбитків Hep-66.4A не виявив жодних серйозних структурних аномалій, що свідчить про певну стабільність геному. Однак спостерігалися деякі зміни у відносній інтенсивності специфічних смуг зі збільшенням кількості пасажів, що свідчить про незначну геномну мінливість протягом тривалого періоду культивування.

Незважаючи на відсутність виявлених мутацій р53 в первинних пухлинах печінки мишей, в деяких лініях гепатоми були виявлені аберації під час розмноження in vitro. Клітинну лінію Hep-66.4A було проаналізовано на наявність мутацій в генах p53 та c-Ha-ras. Відсутність виявлених мутацій в гені р53 в цій лінії на ранніх стадіях пасажування свідчить про стабільний генетичний фон. Ця клітинна лінія слугує цінною моделлю для вивчення гепатоцелюлярної карциноми, забезпечуючи розуміння клітинних і молекулярних механізмів, що лежать в основі пухлиноутворення в печінці.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>