Hep-66.3A

Die Hep-66.4A Hepatom-Zelllinie stammt von einem Lebertumor der Maus, insbesondere vom C57BL/6J-Mausstamm. Diese Zelllinie zeichnet sich durch ihren hepatozytären Ursprung aus, der durch die Analyse von Intermediärfilamentproteinen bestätigt wurde. Hep-66.4A exprimiert die einfachen Keratine K8 und K18, die für normale Leberzellen typisch sind, sowie Vimentin und Keratin K19 in unterschiedlichem Ausmaß. Diese Proteinmuster bestätigen die hepatozytäre Natur der Zelllinie und ihre Klassifizierung als Hepatom-Linie.

Die Zelllinie Hep-66.4A weist eine überwiegend epitheliale Morphologie auf, was auf ihre Herkunft aus Hepatozyten hinweist. Dieser morphologische Phänotyp stimmt mit ihrem Proteinexpressionsprofil überein. Die DNA-Fingerprint-Analyse von Hep-66.4A ergab keine größeren strukturellen Anomalien, was auf ein gewisses Maß an genomischer Stabilität hindeutet. Allerdings wurden mit zunehmender Passagezahl einige Veränderungen in den relativen Intensitäten spezifischer Banden beobachtet, was auf eine geringfügige genomische Variabilität über längere Kulturzeiträume hindeutet.

Obwohl in den primären Lebertumoren der Maus keine p53-Mutationen nachweisbar waren, wurden in einigen Hepatomlinien während der In-vitro-Vermehrung Aberrationen gefunden. Die Zelllinie Hep-66.4A wurde auf Mutationen in den Genen p53 und c-Ha-ras untersucht. Das Fehlen nachweisbarer Mutationen im p53-Gen in dieser Linie während der frühen Passagen deutet auf einen stabilen genetischen Hintergrund hin. Diese Zelllinie dient als wertvolles Modell für die Untersuchung des Leberzellkarzinoms und bietet Einblicke in die zellulären und molekularen Mechanismen, die der Tumorentstehung in der Leber zugrunde liegen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung