الانتقال إلى المحتوى
HEK293-FOLR1
الأنسجة
كلية الجنين
المرض
تم تحويله/تخليده؛ غير مسبب للأورام (خلفية HEK293)

المستندات

HEK293-FOLR1

Cell line · رقم المنتج 305425

إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة للخطوط الخلوية مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فإن الأسعار...

€1,900.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف

إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة لخطوط الخلايا مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فيبلغ السعر حوالي 6,250 يورو.
إذا كنت تمثل كيانًا تجاريًّا أو لم تكن متأكدًا من الفئة التي تنطبق عليك، يرجى الاتصال بنا.


سلسلة الخلايا HEK293-FOLR1 هي سلسلة خلايا HEK293 مستقرة ومُعاد تجميعها وُصُممت للتعبير عن مستقبل FOLR1 بمستوى متوسط إلى مرتفع، يبلغ حوالي 15,000 جزيء لكل خلية. تم تطوير هذه السلسلة الخلوية باستخدام تقنية "لاندينج باد" (landing pad) من شركة inscreenex، مما يضمن دمجًا دقيقًا وقابلًا للتكرار لجين FOLR1 في موقع جينومي محدد ومُثبت مسبقًا. FOLR1، المعروف أيضًا باسم مستقبل الفولات ألفا (FRα) أو FBP، هو بروتين غشائي مثبت بـ GPI له تقارب قوي مع الفولات، مما يسهل نقله إلى الخلايا. يتم التعبير عن FOLR1 بشكل مفرط بشكل ملحوظ في بعض أنواع السرطان، مثل سرطان المبيض وسرطان الثدي وسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة، مما يجعله هدفًا مهمًا للعلاجات المناعية للأورام، بما في ذلك علاجات الخلايا التائية CAR والأجسام المضادة ثنائية النوع.

تم تأكيد التعبير عن FOLR1 في هذا الخط الخلوي باستخدام قياس التدفق الخلوي مع جسم مضاد محدد الهدف، مما يضمن كثافة مستقبلات موثوقة ومتسقة عبر مجموعة الخلايا.

الأنسجة
كلية الجنين
المرض
تم تحويله/تخليده؛ غير مسبب للأورام (خلفية HEK293)
التطبيقات
تطوير الأجسام المضادة الموجهة لمستقبلات FOLR1 ومركبات الأجسام المضادة المرتبطة بالأدوية (ADC) (نظائر فارليتوزوماب)؛ أبحاث سرطان المبيض والرئة وبطانة الرحم؛ اختبارات ADCC/CDC؛ قياس التدفق الخلوي؛ بيولوجيا مستقبلات الفولات

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a FOLR1 expression cassette for folate receptor research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
زمن المضاعفة
حوالي 24-36 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HEK293-FOLR1 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305425)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_6G24

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
FOLR1 (مستقبل حمض الفوليك ألفا (FRα) أو FBP)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و1 ملي مولار من بيروفات الصوديوم، و10 ملي مولار من HEPES، و1٪ NEAA. يُضاف الجينيتجين (G418-Sulfat) لتحقيق تركيز نهائي قدره 1 مجم/ملل.
كاشف التفكك
التربسين-إدتا
إعادة الاستنبات
لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/إيدتا بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية حتى تنفصل الخلايا (5-10 دقائق). راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطًا كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مستنبت جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
2 إلى 4 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد

بعد الذوبان، قم بتقسيم الخلايا بنسبة 1:2 إلى 1:3 في قوارير T25 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.

للحصول على أفضل التصاق وحيوية بعد ذوبان الخلايا، نوصي باستخدام قوارير أو أطباق مغطاة بالكولاجين للبذر الأولي بعد التعافي بالتبريد. طلاء الكولاجين غير مطلوب للزراعة الروتينية اللاحقة للخلايا.

إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين