Gå direkte til indholdet
HEK293-GPRC5D
Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)

Dokumenter

HEK293-GPRC5D

Cell line · Varenummer 305989

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...

€1,900.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder i non-profit-sektoren. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.


HEK293-GPRC5D-celler er humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke det humane G-proteinkoblede receptor-familie C, gruppe 5, medlem D (GPRC5D), en forældreløs receptor, der tilhører klasse C af G-proteinkoblede receptorer. GPRC5D udviser en meget begrænset ekspression i normalt væv, hvor den overvejende ekspression er rapporteret i hårsækkene, keratiniseret væv og plasmaceller. Det er vigtigt at bemærke, at receptoren udtrykkes i høj grad i multipelt myelom og visse andre plasmacellemaligniteter, hvor dens begrænsede fordeling i normalt væv og robuste tumorassocierede ekspression har gjort den til et fremtrædende mål for udvikling af immunterapier, især hos patienter, der får tilbagefald efter BCMA-rettede behandlinger.

HEK293-GPRC5D-celler anvendes i vid udstrækning i hæmatologisk onkologisk forskning og terapeutisk udvikling til karakterisering af GPRC5D-målrettede monoklonale antistoffer, bispecifikke T-celle-engagerere, antistof-lægemiddelkonjugater samt CAR-T- eller CAR-NK-celleterapier. Det stabile rekombinante ekspressionssystem muliggør kvantitativ evaluering af antigenbindingsaffinitet, receptorbelægning, overfladeekspressionsdensitet, epitopspecificitet og målafhængig cytotoksicitet. Disse celler er særligt værdifulde til vurdering af aktiviteten og selektiviteten af konstruerede immuncelleterapier og T-celleomdirigerende biologiske lægemidler rettet mod GPRC5D-positive maligniteter. Yderligere anvendelser omfatter udvikling af flowcytometri-assays, reporterassays, højgennemløbsscreening og validering af receptorspecifikke billeddannelsesmidler eller diagnostiske reagenser.

Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
Anvendelser
Udvikling af GPRC5D-målrettede antistoffer og bispecifikke antistoffer; behandlinger mod multipelt myelom; CAR-T-celleterapi; ADCC/CDC-analyser; flowcytometri; screening inden for immuno-onkologi

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 24–36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293-GPRC5D (Cytion-katalognummer 305989)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6G25

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
GPRC5D

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 1 mg/mL.
Dissociationsreagens
Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning

Efter optøning deles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og klæbe (for klæbende kulturer) i mindst 24 timer.

Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster