
- Væv
- Fosterets nyre
- Sygdom
- Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
Dokumenter
HEK293-GPRC5D
Cell line · Varenummer 305989
Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...
Tilpasning / Anbefalinger
- HEK293-GPRC5DCell line€1,900.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder i non-profit-sektoren. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.
HEK293-GPRC5D-celler er humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke det humane G-proteinkoblede receptor-familie C, gruppe 5, medlem D (GPRC5D), en forældreløs receptor, der tilhører klasse C af G-proteinkoblede receptorer. GPRC5D udviser en meget begrænset ekspression i normalt væv, hvor den overvejende ekspression er rapporteret i hårsækkene, keratiniseret væv og plasmaceller. Det er vigtigt at bemærke, at receptoren udtrykkes i høj grad i multipelt myelom og visse andre plasmacellemaligniteter, hvor dens begrænsede fordeling i normalt væv og robuste tumorassocierede ekspression har gjort den til et fremtrædende mål for udvikling af immunterapier, især hos patienter, der får tilbagefald efter BCMA-rettede behandlinger.
HEK293-GPRC5D-celler anvendes i vid udstrækning i hæmatologisk onkologisk forskning og terapeutisk udvikling til karakterisering af GPRC5D-målrettede monoklonale antistoffer, bispecifikke T-celle-engagerere, antistof-lægemiddelkonjugater samt CAR-T- eller CAR-NK-celleterapier. Det stabile rekombinante ekspressionssystem muliggør kvantitativ evaluering af antigenbindingsaffinitet, receptorbelægning, overfladeekspressionsdensitet, epitopspecificitet og målafhængig cytotoksicitet. Disse celler er særligt værdifulde til vurdering af aktiviteten og selektiviteten af konstruerede immuncelleterapier og T-celleomdirigerende biologiske lægemidler rettet mod GPRC5D-positive maligniteter. Yderligere anvendelser omfatter udvikling af flowcytometri-assays, reporterassays, højgennemløbsscreening og validering af receptorspecifikke billeddannelsesmidler eller diagnostiske reagenser.
- Væv
- Fosterets nyre
- Sygdom
- Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
- Anvendelser
- Udvikling af GPRC5D-målrettede antistoffer og bispecifikke antistoffer; behandlinger mod multipelt myelom; CAR-T-celleterapi; ADCC/CDC-analyser; flowcytometri; screening inden for immuno-onkologi
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-S1
- Oplysninger om GMO-status
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitheliale celler
- Fordoblingstid
- ca. 24–36 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HEK293-GPRC5D (Cytion-katalognummer 305989)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G25
05Udtryk og modtagelighed
- Udtrykte receptorer
- GPRC5D
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 1 mg/mL.
- Dissociationsreagens
- Trypsin-EDTA
- Oddyrkning
- Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
- Opdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtæthed
- 2 til 4 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
Efter optøning deles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og klæbe (for klæbende kulturer) i mindst 24 timer.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- Foster
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Ansvarsfraskrivelse
- Vores celler leveres udelukkende til in vitro-laboratorieforskningsformål og er ikke beregnet til klinisk eller diagnostisk brug, og de må heller ikke administreres til mennesker eller bruges til veterinære formål. Brugere skal overholde alle gældende retningslinjer og regler for håndtering og brug af disse celler i en forskningsmæssig sammenhæng.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der gælder aftaler med tredjeparter
- Ja


.jpg)