Gå direkte til indholdet
HEK293-HER2
Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)

Dokumenter

HEK293-HER2

Cell line · Varenummer 305422

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...

€1,900.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder i non-profit-sektoren. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis De repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori De tilhører, bedes De kontakte os.


HEK293-HER2-cellelinjen er en stabil rekombinant HEK293-cellelinje, der er udviklet til at udtrykke HER2-receptoren på et højt niveau, ca. 75.000 molekyler pr. celle. Denne cellelinje er udviklet ved hjælp af inscreenex's landing pad-teknologi, hvilket sikrer præcis og reproducerbar integration af HER2-genet på et specifikt, forvalideret genomisk locus. HER2, også kendt som ERBB2 eller CD340, er en receptortyrosinkinase, der tilhører familien af epidermale vækstfaktorreceptorer (EGFR). HER2 spiller en afgørende rolle i cellevækst og -differentiering og danner ofte heterodimere med andre medlemmer af EGFR-familien, såsom EGFR, HER3 eller HER4, for at fremme celleproliferation. Overekspression af HER2 er stærkt forbundet med visse kræftformer, især bryst- og æggestokkræft, hvilket gør det til et kritisk mål for kræftbehandlinger, herunder monoklonale antistoffer som Trastuzumab (Herceptin) og Pertuzumab (Perjeta).

Ekspressionen af HER2 i denne cellelinje blev bekræftet ved hjælp af flowcytometri med et målspecifikt antistof, hvilket sikrede en pålidelig og konsistent receptortæthed på tværs af cellepopulationen.

Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
Anvendelser
Udvikling af HER2-målrettede antistoffer (trastuzumab, pertuzumab-analoger); screening af ADC’er; ADCC-/CDC-analyser; lægemidler mod bryst-, mave- og lungekræft; udvikling af bispecifikke antistoffer

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HEK293 derivative contains a human HER2 expression construct, enabling targeted therapy and receptor signaling studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 24–36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293-HER2 (Cytion katalognummer 305422)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6G26

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
HER2

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 1 mg/mL.
Dissociationsreagens
Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning

Efter optøning opdeles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og hæfte i mindst 24 timer.

For at opnå den bedste vedhæftning og levedygtighed efter optøning af cellerne anbefaler vi at bruge kollagencoatede kolber eller plader til den første udsåning efter kryogendannelse. Kollagenbelægning er ikke nødvendig til efterfølgende rutinemæssig dyrkning af cellerne.

Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster