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15P-1
Gewebe
Hoden
Metastasenherd
Primärtumorlokalisation (Hoden)

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15P-1

Cell line · Artikelnummer 305191

15p-1-Zellen sind eine aus Mus musculus gewonnene Säugetierzelllinie, die speziell zur Untersuchung der zellulären Reaktionen auf Steroidhormone eingesetzt wird. Sie stammen aus...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

15p-1-Zellen sind eine aus Mus musculus gewonnene Säugetierzelllinie, die speziell für die Untersuchung zellulärer Reaktionen auf Steroidhormone eingesetzt wird. Diese aus dem Hodengewebe von Mäusen stammenden Zellen weisen eine einzigartige Empfindlichkeit gegenüber Androgenen auf, was sie für die Endokrinologie und die Krebsforschung besonders wertvoll macht. Die 15p-1-Zelllinie exprimiert den Androgenrezeptor (AR), was die Untersuchung androgener Effekte auf die Genexpression, das Zellwachstum und Differenzierungsprozesse ermöglicht.

Typischerweise werden 15p-1-Zellen eingesetzt, um die von Androgenen beeinflussten molekularen Signalwege und deren Rolle bei Erkrankungen wie Prostatakrebs zu erforschen. Sie bieten eine kontrollierte In-vitro-Umgebung zur Untersuchung der Wechselwirkungen zwischen Androgenen und ihren zellulären Rezeptoren und ermöglichen so Einblicke sowohl in normale physiologische als auch in pathologische Zustände. Diese Zelllinie spielt zudem eine entscheidende Rolle beim Screening potenzieller Arzneimittel, die auf androgenbezogene Signalwege abzielen, und trägt so zur Entwicklung therapeutischer Strategien bei.

Gewebe
Hoden
Metastasenherd
Primärtumorlokalisation (Hoden)
Anwendungen
Biologie des Androgenrezeptors; Androgensignalweg bei Prostatakrebs; Hodenendokrinologie; androgenabhängige Genexpression; Wirkstoffscreening auf Inhibitoren des Androgen-Signalwegs

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This mouse testis cell line (15P-1) contains the MPyV large T antigen introduced via an MPyV-based vector, supporting transformation and sustained proliferation. The modification is integrated into murine testis-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzellen

04Bezeichner

Quellenangabe
15P-1 (Cytion-Katalognummer 305191)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_6552

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie zunächst das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Calcium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6 x DBA/2
Alter des Spenders
6 Monate