Mine otse sisu juurde
15P-1
Kude
Testis
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (munand)

Dokumendid

15P-1

Cell line · Toote number 305191

15p-1 rakud on Mus musculus’est saadud imetajate rakuliin, mida kasutatakse spetsiaalselt rakkude reaktsioonide uurimiseks steroidhormoonidele. Pärinevad...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

15p-1 rakud on Mus musculus’est pärinev imetajate rakuliin, mida kasutatakse spetsiaalselt rakkude reaktsioonide uurimiseks steroidhormoonidele. Need hiirte munandikudest pärinevad rakud ilmutavad ainulaadset tundlikkust androgeenide suhtes, mis teeb need eriti väärtuslikuks endokrinoloogias ja vähiuuringutes. 15p-1 rakuliin ekspresseerib androgeeniretseptorit (AR), võimaldades uurida androgeenide mõju geeniekspressioonile, rakkude kasvule ja diferentseerumisprotsessidele.

Tavaliselt kasutatakse 15p-1 rakke androgeenide poolt mõjutatavate molekulaarsete signaaliteede ja nende rolli uurimiseks sellistes haigustes nagu eesnäärmevähk. Need rakud pakuvad kontrollitud in vitro keskkonda androgeenide ja nende rakuliste retseptorite vaheliste interaktsioonide analüüsimiseks, aidates saada ülevaadet nii normaalsetest füsioloogilistest kui ka patoloogilistest seisunditest. See rakuliin on oluline ka androgeenidega seotud signaaliteid sihtivate potentsiaalsete ravimite sõelumisel, aidates kaasa ravistrateegiate väljatöötamisele.

Kude
Testis
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (munand)
Rakendused
Androgeeniretseptori bioloogia; eesnäärmevähi androgeenisignalisatsioon; munandite endokrinoloogia; androgeenidele reageeriv geeniekspressioon; androgeeniraja inhibiitorite ravimite sõelumine

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This mouse testis cell line (15P-1) contains the MPyV large T antigen introduced via an MPyV-based vector, supporting transformation and sustained proliferation. The modification is integrated into murine testis-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud

04Tunnused

Viide
15P-1 (Cytioni katalooginumber 305191)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_6552

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Kõigepealt eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6 x DBA/2
Doonori vanus
6 kuud