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15P-1
Tecido
Testículo
Local da metástase
Localização do tumor primário (testiculo)

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15P-1

Cell line · Número do produto 305191

As células 15p-1 são uma linha celular de mamíferos derivada do Mus musculus, utilizada especificamente para o estudo das respostas celulares às hormonas esteróides. Originadas...

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01Informações gerais

Descrição

As células 15p-1 são uma linha celular de mamíferos derivada do Mus musculus, utilizada especificamente para o estudo das respostas celulares às hormonas esteróides. Originárias do tecido testicular de ratos, estas células apresentam uma sensibilidade única aos androgénios, o que as torna particularmente valiosas na endocrinologia e na investigação do cancro. A linha celular 15p-1 expressa o recetor de androgénios (AR), permitindo o estudo dos efeitos androgénicos na expressão génica, no crescimento celular e nos processos de diferenciação.

Caracteristicamente, as células 15p-1 são utilizadas para explorar as vias moleculares influenciadas pelos androgénios e o seu papel em doenças como o cancro da próstata. Proporcionam um ambiente in vitro controlado para analisar as interações entre os androgénios e os seus recetores celulares, facilitando a compreensão tanto dos estados fisiológicos normais como dos patológicos. Esta linha celular é também fundamental na triagem de potenciais fármacos que têm como alvo vias relacionadas com os androgénios, contribuindo para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas.

Tecido
Testículo
Local da metástase
Localização do tumor primário (testiculo)
Aplicações
Biologia do recetor de androgénios; sinalização dos androgénios no cancro da próstata; endocrinologia testicular; expressão de genes sensíveis aos androgénios; triagem de fármacos para inibidores da via dos androgénios

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This mouse testis cell line (15P-1) contains the MPyV large T antigen introduced via an MPyV-based vector, supporting transformation and sustained proliferation. The modification is integrated into murine testis-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais

04Identificadores

Referência
15P-1 (número de catálogo da Cytion 305191)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6552

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Em primeiro lugar, remover o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para os frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para os frascos T75, utilizar 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
C57BL/6 x DBA/2
Idade do dador
6 meses