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Gewebe
Embryo
Krankheit
Normal
Metastasenherd
Embryo (Stadium des Rückenverschlusses)
Synonyme
KC, K C

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KC

Cell line · Artikelnummer 300604

KC (Kc167) ist eine embryonale Zelllinie von Drosophila melanogaster, die aus einem weiblichen Embryo im Stadium des dorsalen Verschlusses gewonnen wurde. Die Linie wurde ursprünglich etabliert und hat...

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Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

KC (Kc167) ist eine embryonale Zelllinie von Drosophila melanogaster, die aus einem weiblichen Embryo im Stadium des dorsalen Verschlusses gewonnen wurde. Die Linie wurde ursprünglich etabliert und wird seitdem in der Drosophila-Zellbiologie, bei genetischen Screenings und in der funktionellen Genomik weit verbreitet eingesetzt. Kc167-Zellen wurden mit SV40 immortalisiert und wachsen semi-adhärent, wobei sie eine gemischte Population aus anhaftenden und lose schwebenden Zellen bilden. Sie gehören zu den am besten charakterisierten Drosophila-Zelllinien und eignen sich hervorragend für die RNAi-vermittelte Genstilllegung, was sie zu einem Eckpfeiler für genomweite RNAi-Screenings in der Biologie wirbelloser Tiere macht.

KC-Zellen eignen sich für die Drosophila-Zellbiologie, genomweite RNAi- und CRISPR-Screenings, Untersuchungen zu Signaltransduktionswegen (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), die Forschung zur angeborenen Immunität sowie für vergleichende Studien zu evolutionär konservierten Signalwegen. Das vollständig sequenzierte und annotierte Drosophila-Genom in Verbindung mit umfangreichen öffentlichen Datenbanken für RNAi-Reagenzien (z. B. DRSC/TRiP) macht KC-Zellen besonders leistungsfähig für unvoreingenommene funktionelle Genomforschung. Aufgrund der SV40-Immortalisierung gilt die Einstufung BSL-2.

Gewebe
Embryo
Krankheit
Normal
Metastasenherd
Embryo (Stadium des Rückenverschlusses)
Anwendungen
Drosophila-Zellbiologie; genomweite RNAi-Screenings; CRISPR-Screenings; Signaltransduktion (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); angeborene Immunität; funktionelle Genomik bei Wirbellosen
Synonyme
  • KC
  • K C

02Klassifizierung

Organismus
Fruchtfliege
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S2
Angaben zum GVO-Status
GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
halbadhärent, epithelartig
Zelltyp
Embryonale Zellen
Verdopplungszeit
ca. 24 bis 48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
KC (Cytion-Katalognummer 300604)
NCBI-Steuer-ID
7227
Cellosaurus
CVCL_Z833

05Expression und Anfälligkeit

Anfälligkeit für Viren
SV40-immunisiert

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Schneider-Drosophila-Medium + 2 mM Glutamin + 10 % fötales Rinderserum (FBS).
Inkubationsatmosphäre

25 °C, Umgebungsluft (kein CO₂ erforderlich).

Nahrungsergänzungsmittel
Das Medium mit 2 mM Glutamin und 10 % FBS ergänzen
Dissoziationsreagenz
Nicht erforderlich (teilweise anhaftend; vorsichtig resuspendieren)
Subkultivierung
Die Kultur vorsichtig pipettieren, um die halbadhärenten Zellen wieder in Suspension zu bringen. Ein geeignetes Volumen in ein neues Kolben überführen und frisches, vorgewärmtes Schneider-Medium hinzufügen. Auf eine Dichte von 5 × 10⁵ bis 1 × 10⁶ Zellen/ml verdünnen. Bei 25 °C in Umgebungsluft ohne CO₂ inkubieren.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
5 × 10⁵ bis 1 × 10⁶ Zellen/ml
Flüssigkeitswechsel
Alle 2 bis 3 Tage
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Phase des Rückenverschlusses