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AtT-20
Gewebe
Hypophyse
Krankheit
Hypophysen-Neoplasmen der Maus
Synonyme
AtT20, AtT 20, ATT-20

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AtT-20

Cell line · Artikelnummer 305161

The AtT-20 cell line is a well-characterized mouse pituitary tumor cell line derived from anterior pituitary cells. These cells originate from a strain of...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die AtT-20-Zelllinie ist eine gut charakterisierte Hypophysentumor-Zelllinie der Maus, die aus Hypophysenvorderwandzellen gewonnen wird. Diese Zellen stammen von einem Mäusestamm, der als AtT-20/D16v-F2 bekannt ist, und werden in erster Linie für die Untersuchung der Hypophysenfunktion und -regulierung verwendet, wobei der Schwerpunkt auf der Synthese und Sekretion von adrenocorticotropem Hormon (ACTH) liegt. ACTH ist entscheidend für die Funktion der Nebenniere und spielt eine Schlüsselrolle bei der Stressreaktion und der Stoffwechselregulation.

AtT-20-Zellen weisen typische Merkmale auf, die für Studien in der Neuroendokrinologie und Pharmakologie von Bedeutung sind, wie die Produktion und Sekretion von Pro-Opiomelanocortin (POMC), dem Vorläufermolekül für ACTH. Die Zellen reagieren auf das Corticotropin-freisetzende Hormon (CRH) und andere hypothalamische Hormone, was sie zu einem hervorragenden Modell für die Erforschung der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse (HPA) in vitro macht. Darüber hinaus können AtT-20-Zellen aufgrund ihrer gut definierten Sekretionswege zur Untersuchung der Mechanismen der Verarbeitung, Verpackung und Sekretion von Peptidhormonen verwendet werden.

AtT-20-Zellen wurden in verschiedenen Studien eingesetzt, u. a. zur Untersuchung von Genexpressionsprofilen unter verschiedenen Behandlungsbedingungen, von intrazellulären Signalwegen, an denen cAMP beteiligt ist, und von Auswirkungen genetischer Veränderungen auf die Hormonsekretion. Diese Zellen sind auch wertvoll für die Bewertung der pharmakologischen Eigenschaften potenzieller Arzneimittelkandidaten, die auf Komponenten der HPA-Achse abzielen.

Gewebe
Hypophyse
Krankheit
Hypophysen-Neoplasmen der Maus
Synonyme
  • AtT20
  • AtT 20
  • ATT-20

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Kleine runde Zellen

04Bezeichner

Quellenangabe
AtT-20 (Cytion-Katalognummer 305161)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_2300

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Adrenocorticotropes Hormon(Acth)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820608a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 2,5% FBS, 15% Pferdeserum
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
LAF1