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B-LCL-HROC173
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Nicht zutreffend (EBV-transformierte B-LCL eines CRC-Patienten; Suspensionskultur)
Synonyme
TiBc HROC173

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B-LCL-HROC173

Cell line · Artikelnummer 302039

The cell line was derived from the peripheral blood of a patient with CRC.

€800.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Die Zelllinie wurde aus dem peripheren Blut eines Patienten mit CRC gewonnen.
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Nicht zutreffend (EBV-transformierte B-LCL eines CRC-Patienten; Suspensionskultur)
Anwendungen
T-Zell- und NK-Zell-Assays; HLA-Typisierung; Untersuchungen zur Antigenpräsentation; Zielzellen für CTL-Assays; Immunologie des kolorektalen Karzinoms; HROC173-Studien mit patientenspezifischen Biobankproben
Synonyme
  • TiBc HROC173

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
GVO-Status
GMO-S2
Angaben zum GVO-Status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
B-Lymphoblasten
Verdopplungszeit
24 bis 48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
B-LCL-HROC173 (Cytion-Katalognummer 302039)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Transformant: EBV

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Split-Verhältnis
1 bis 4
Aussaatdichte
2 bis 5 × 10⁵ Zellen/ml
Flüssigkeitswechsel
Alle 2 bis 3 Tage
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
45 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch