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B-LCL-HROC173
Tecido
Sangue periférico
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Não aplicável (LCL de células B transformadas pelo EBV de um doente com CCR; cultura em suspensão)
Sinónimos
TiBc HROC173

Documentos

B-LCL-HROC173

Cell line · Número do produto 302039

The cell line was derived from the peripheral blood of a patient with CRC.

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Feito por encomenda
1

01Informações gerais

Descrição
A linha celular foi derivada do sangue periférico de um doente com CRC.
Tecido
Sangue periférico
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Não aplicável (LCL de células B transformadas pelo EBV de um doente com CCR; cultura em suspensão)
Aplicações
Ensaios com células T e células NK; tipagem HLA; estudos sobre a apresentação de antigénios; células-alvo para ensaios de CTL; imunologia do cancro colorretal; estudos com biobancos de amostras correspondentes aos do doente HROC173
Sinónimos
  • TiBc HROC173

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S2
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Células redondas
Tipo de célula
Linfoblasto B
Tempo de duplicação
24 a 48 horas

04Identificadores

Referência
B-LCL-HROC173 (número de catálogo Cytion 302039)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Transformante: EBV

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Rácio de divisão
1 a 4
Densidade de sementeira
2 a 5 × 10⁵ células/ml
Renovação de fluidos
A cada 2 ou 3 dias
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
45 anos
Etnia
Caucasiano