- Tecido
- Sangue periférico
- Doença
- Carcinoma
- Local da metástase
- Não aplicável (LCL de células B transformadas pelo EBV de um doente com CCR; cultura em suspensão)
- Sinónimos
- TiBc HROC173
Documentos
B-LCL-HROC173
Cell line · Número do produto 302039
The cell line was derived from the peripheral blood of a patient with CRC.
Personalização / Recomendações
- B-LCL-HROC173Cell line€800.00
01Informações gerais
- Descrição
- A linha celular foi derivada do sangue periférico de um doente com CRC.
- Tecido
- Sangue periférico
- Doença
- Carcinoma
- Local da metástase
- Não aplicável (LCL de células B transformadas pelo EBV de um doente com CCR; cultura em suspensão)
- Aplicações
- Ensaios com células T e células NK; tipagem HLA; estudos sobre a apresentação de antigénios; células-alvo para ensaios de CTL; imunologia do cancro colorretal; estudos com biobancos de amostras correspondentes aos do doente HROC173
- Sinónimos
- TiBc HROC173
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Suspensão
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S2
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 2
03Características
- Morfologia
- Células redondas
- Tipo de célula
- Linfoblasto B
- Tempo de duplicação
- 24 a 48 horas
04Identificadores
- Referência
- B-LCL-HROC173 (número de catálogo Cytion 302039)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Expressão e suscetibilidade
- Vírus
- Transformante: EBV
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
- Subcultura
- Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
- Rácio de divisão
- 1 a 4
- Densidade de sementeira
- 2 a 5 × 10⁵ células/ml
- Renovação de fluidos
- A cada 2 ou 3 dias
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 45 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- Aplicam-se os acordos com terceiros
- Sim