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B-LCL-HROC173
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Non applicabile (LCL B trasformate dall’EBV provenienti da un paziente affetto da CRC; coltura in sospensione)
Sinonimi
TiBc HROC173

Documenti

B-LCL-HROC173

Cell line · Codice prodotto 302039

The cell line was derived from the peripheral blood of a patient with CRC.

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Su ordinazione
1

01Informazioni generali

Descrizione
La linea cellulare è stata derivata dal sangue periferico di un paziente affetto da CRC.
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Non applicabile (LCL B trasformate dall’EBV provenienti da un paziente affetto da CRC; coltura in sospensione)
Applicazioni
Analisi delle cellule T e delle cellule NK; tipizzazione HLA; studi sulla presentazione dell’antigene; cellule bersaglio per l’analisi dei linfociti T citotossici (CTL); immunologia del cancro del colon-retto; studi su biobanche abbinate ai pazienti HROC173
Sinonimi
  • TiBc HROC173

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Presenza di OGM
GMO-S2
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tipo di cellula
Linfoblasto B
Tempo di raddoppio
da 24 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
B-LCL-HROC173 (numero di catalogo Cytion 302039)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: EBV

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 4
Densità di semina
da 2 a 5 × 10⁵ cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
Ogni 2 o 3 giorni
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
45 anni
Etnia
Caucasico