Gå til innholdet
B-LCL-HROC173
Vev
Perifert blod
Sykdom
Karsinom
Metastaseområde
Ikke relevant (EBV-transformert B-LCL fra pasient med tykktarmskreft; suspensjonskultur)
Synonymer
TiBc HROC173

Dokumenter

B-LCL-HROC173

Cell line · Produktnummer 302039

The cell line was derived from the peripheral blood of a patient with CRC.

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
Cellelinjen ble avledet fra perifert blod fra en pasient med CRC.
Vev
Perifert blod
Sykdom
Karsinom
Metastaseområde
Ikke relevant (EBV-transformert B-LCL fra pasient med tykktarmskreft; suspensjonskultur)
Søknader
T-celle- og NK-celleanalyser; HLA-typing; studier av antigenpresentasjon; målceller for CTL-analyser; immunologi ved tykktarmskreft; HROC173-studier med pasienttilpassede biobankprøver
Synonymer
  • TiBc HROC173

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
GMO-status
GMO-S2
Detaljer om GMO-status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler
Celletype
B-lymfoblast
Fordoblingstid
24 til 48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-HROC173 (Cytion-katalognummer 302039)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: EBV

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % varmeinaktivert FBS
Subkultivering
Homogeniser cellesuspensjonen i kolben forsiktig ved å pipettere opp og ned, og ta deretter en representativ prøve for å bestemme celletettheten per ml. Fortynn suspensjonen til en cellekonsentrasjon på 1 x 105 celler/ml med ferskt dyrkningsmedium, og fordel den justerte suspensjonen i nye kolber for videre dyrking.
Oppdelingsforhold
1 til 4
Såtetthet
2 til 5 × 10⁵ celler/ml
Væskefornyelse
Hver 2. til 3. dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
45 år
Etnisitet
Kaukasisk