ETK-1

ETK-1 ist eine menschliche Zelllinie des intrahepatischen Cholangiokarzinoms (IHCCA), die ursprünglich aus der Aszitesflüssigkeit eines erwachsenen Patienten mit sarkomatoidem Cholangiokarzinom gewonnen wurde. Der Tumor, aus dem ETK-1 gewonnen wurde, wies sowohl tubuläre Adenokarzinom- als auch sarkomatoide Komponenten auf, und die Zelllinie spiegelt den sarkomatoiden Phänotyp wider. ETK-1-Zellen wachsen adhärent als einheitliche Epithelmonoschicht mit Kopfsteinpflaster-Muster, die hauptsächlich aus kleinen polygonalen Zellen mit runden bis ovalen Kernen und markanten Nukleolen besteht. Zellen in frühen Passagen wiesen eine Populationsverdopplungszeit von etwa 70 Stunden und einen hyperdiploiden Karyotyp mit einer modalen Chromosomenzahl im mittleren 70er-Bereich auf, was mit der für aggressive Malignome der Gallenwege typischen chromosomalen Instabilität übereinstimmt.

Immunphänotypisch exprimieren ETK-1-Zellen Marker des Gallengangsepithels, darunter γ-Glutamyltranspeptidase (GGT), Zytokeratin 18 (CK18) und Zytokeratin 19 (CK19), was ihren cholangiozytären Ursprung bestätigt. Unter basalen Bedingungen sind sie negativ für hepatozytenassoziierte Marker wie Alpha-Fetoprotein (AFP) und Albumin. ETK-1-Zellen exprimieren Vimentin, was ihre sarkomatoiden Merkmale und ihren partiellen mesenchymalen Phänotyp widerspiegelt, während ihnen die Expression des karzinoembryonalen Antigens (CEA) und des Kohlenhydrat-Antigens 19-9 (CA19-9) fehlt. Dieses Markerprofil entspricht der im Primärtumor beobachteten sarkomatoiden Komponente und unterstreicht Merkmale, die mit Eigenschaften im Sinne einer epithelial-mesenchymalen Transition übereinstimmen.

ETK-1 wurde zudem als Modell zur Untersuchung der zellulären Plastizität und der Differenzierung entlang der Zelllinie beim Cholangiokarzinom verwendet. Die Behandlung mit dem DNA-Methyltransferase-Inhibitor 5-Azacytidin induzierte morphologische und phänotypische Veränderungen, was zu einer abgeleiteten Zelllinie mit hepatozytenähnlichen Merkmalen führte, darunter die Expression von AFP, Albumin, Integrin α1 und Thrombopoietin sowie der Verlust bestimmter Gallenmarker. In Xenotransplantatmodellen bilden unbehandelte ETK-1-Zellen Tumoren, die mit einem tubulären Adenokarzinom übereinstimmen und einen duktalen Phänotyp aufweisen. Diese Ergebnisse zeigen, dass ETK-1 seine Differenzierungsplastizität beibehält und als wertvolles In-vitro-System zur Untersuchung der Transdifferenzierung von Gallengangsepithel zu Hepatozyten, der epigenetischen Regulation sowie der Tumorheterogenität beim intrahepatischen Cholangiokarzinom dient.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung