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G-361
Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Synonyme
G-361, G361-mel, G361mel

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G-361

Cell line · Artikelnummer 302157

G-361 is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in the skin of an adult patient. This cell line exhibits melanin production, which is a...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

G-361 ist eine humane Melanomzelllinie, die aus einer metastatischen Stelle in der Haut eines erwachsenen Patienten stammt. Diese Zelllinie weist eine Melaninproduktion auf, die ein charakteristisches Merkmal von Melanozyten und Melanomzellen ist. G-361-Zellen sind für ihre epithelähnliche Morphologie bekannt und werden häufig in der Forschung über Hautkrebs, insbesondere Melanom, eingesetzt. Die Zellen sind wertvoll für die Untersuchung der Biologie und Pathogenese des Melanoms, einschließlich Zellproliferation, Migration und Invasion. Darüber hinaus dienen sie als nützliches Modell für das Screening von Medikamenten und für das Verständnis der Mechanismen der Chemotherapieresistenz bei Melanomen.

Die Zelllinie G-361 wurde zur Erforschung der genetischen und molekularen Grundlagen des Melanoms verwendet. Sie hat bei Studien zur Untersuchung der Rolle verschiedener Onkogene und Tumorsuppressorgene bei der Krebsentstehung eine wichtige Rolle gespielt. So hat die Forschung mit G-361-Zellen zum Beispiel zu Erkenntnissen über den MAPK/ERK-Signalweg beigetragen, der beim Melanom häufig gestört ist. Diese Zellen werden auch häufig in Tests zur Bewertung der Wirksamkeit neuer therapeutischer Wirkstoffe verwendet, was sie für die translationale Forschung und die Entwicklung gezielter Therapien für das Melanom entscheidend macht.

Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Synonyme
  • G-361
  • G361-mel
  • G361mel

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
G-361 (Cytion Katalognummer 302157)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1220

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
G6PD, B
Produkte
Melanin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiles Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
31 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch