Siirry sisältöön
G-361
Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Synonyymit
G-361, G361-mel, G361mel

Asiakirjat

G-361

Cell line · Tuotenumero 302157

G-361 is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in the skin of an adult patient. This cell line exhibits melanin production, which is a...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

G-361 on ihmisen melanoomasolulinja, joka on peräisin aikuispotilaan ihon etäpesäkkeestä. Tämä solulinja tuottaa melaniinia, joka on melanosyyttien ja melanoomasolujen ominaispiirre. G-361-solut tunnetaan epiteelin kaltaisesta morfologiastaan, ja niitä käytetään laajasti ihosyöpään, erityisesti melanoomaan, keskittyvässä tutkimuksessa. Solut ovat arvokkaita melanooman biologian ja patogeneesin tutkimisessa, mukaan lukien solujen proliferaatio, migraatio ja invaasio. Lisäksi ne toimivat hyödyllisenä mallina lääkkeiden seulonnassa ja melanooman kemoterapialle vastustuskyvyn mekanismien ymmärtämisessä.

G-361-solulinjaa on käytetty melanooman geneettisten ja molekulaaristen taustatekijöiden tutkimiseen. Se on ollut keskeisessä asemassa tutkimuksissa, joissa on tutkittu eri onkogeenien ja kasvainsuppressorigeenien roolia syövän etenemisessä. Esimerkiksi G-361-soluja hyödyntävä tutkimus on auttanut ymmärtämään MAPK/ERK-reittiä, joka on usein häiriintynyt melanooman yhteydessä. Näitä soluja käytetään myös yleisesti testeissä, joilla arvioidaan uusien terapeuttisten aineiden tehoa, joten ne ovat ratkaisevan tärkeitä translaatiotutkimuksessa ja melanooman kohdennettujen hoitojen kehittämisessä.

Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Synonyymit
  • G-361
  • G361-mel
  • G361mel

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
G-361 (Cytionin luettelonumero 302157)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1220

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
G6PD, B
Tuotteet
Melaniini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
31 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen