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G-361
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma
Sinonimi
G-361, G361-mel, G361mel

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G-361

Cell line · Codice prodotto 302157

G-361 is a human melanoma cell line derived from a metastatic site in the skin of an adult patient. This cell line exhibits melanin production, which is a...

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01Informazioni generali

Descrizione

G-361 è una linea cellulare di melanoma umano derivata da un sito metastatico nella pelle di un paziente adulto. Questa linea cellulare presenta una produzione di melanina, caratteristica dei melanociti e delle cellule di melanoma. Le cellule G-361 sono note per la loro morfologia simil-epiteliale e sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro della pelle, in particolare sul melanoma. Le cellule sono preziose per studiare la biologia e la patogenesi del melanoma, tra cui la proliferazione, la migrazione e l'invasione cellulare. Inoltre, sono un modello utile per lo screening dei farmaci e per comprendere i meccanismi di resistenza alla chemioterapia nel melanoma.

La linea cellulare G-361 è stata utilizzata per esplorare le basi genetiche e molecolari del melanoma. È stata fondamentale negli studi che hanno indagato il ruolo di vari oncogeni e geni soppressori del tumore nella progressione del cancro. Ad esempio, la ricerca che utilizza le cellule G-361 ha contribuito a far luce sulla via MAPK/ERK, spesso disregolata nel melanoma. Queste cellule sono inoltre comunemente utilizzate nei test per valutare l'efficacia di nuovi agenti terapeutici, il che le rende fondamentali per la ricerca traslazionale e lo sviluppo di trattamenti mirati per il melanoma.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma
Sinonimi
  • G-361
  • G361-mel
  • G361mel

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
G-361 (numero di catalogo Cytion 302157)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1220

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
G6PD, B
Prodotti
Melanina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820200a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
31 anni
Etnia
Europeo