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HSC-T6
Gewebe
Leber
Synonyme
HSCT6

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HSC-T6

Cell line · Artikelnummer 305199

The HSC-T6 cell line is a well-characterized hepatic stellate cell line derived from adult rat liver tissue. These cells play a critical role in liver phy...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HSC-T6-Zelllinie ist eine gut charakterisierte hepatische Stellat-Zelllinie, die aus dem Lebergewebe erwachsener Ratten stammt. Diese Zellen spielen eine entscheidende Rolle in der Leberphysiologie und -pathologie, insbesondere bei den Prozessen der Leberfibrose und -zirrhose. Hepatische Stellatzellen sind unter normalen physiologischen Bedingungen für die Speicherung von Vitamin A in Lipidtröpfchen verantwortlich. Bei Leberverletzungen transdifferenzieren sie in myofibroblastenähnliche Zellen, die extrazelluläre Matrixproteine absondern und so zur fibrotischen Reaktion beitragen. Die HSC-T6-Zelllinie wurde ausgiebig als Modell für die Untersuchung dieser Mechanismen genutzt, da sie das In-vivo-Verhalten aktivierter stellatärer Leberzellen nachahmen kann.

HSC-T6-Zellen exprimieren wichtige Marker wie α-SMA (Smooth Muscle Actin), GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) und Desmin, die auf ihren myofibroblastischen Phänotyp hinweisen. Diese Zellen weisen auch eine beträchtliche Proliferationsfähigkeit auf und reagieren auf verschiedene Zytokine und Wachstumsfaktoren, was sie zu einem unschätzbaren Instrument für die Untersuchung der Signalwege macht, die an der Leberfibrose beteiligt sind. Forscher haben HSC-T6-Zellen eingesetzt, um therapeutische Ziele und Interventionen zu erforschen, die darauf abzielen, die Fibrose zu mildern und die Leberregeneration zu fördern. Die Verfügbarkeit dieser Zelllinie hat somit zu bedeutenden Fortschritten beim Verständnis von Lebererkrankungen und bei der Entwicklung potenzieller Behandlungen beigetragen.

Gewebe
Leber
Synonyme
  • HSCT6

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
HSC-T6 (Cytion-Katalognummer 305199)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0315

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Sprague Dawley
Alter des Spenders
Erwachsener