Siirry sisältöön
HSC-T6
Kudos
Maksa
Synonyymit
HSCT6

Asiakirjat

HSC-T6

Cell line · Tuotenumero 305199

The HSC-T6 cell line is a well-characterized hepatic stellate cell line derived from adult rat liver tissue. These cells play a critical role in liver phy...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HSC-T6-solulinja on hyvin karakterisoitu maksan stellatesolulinja, joka on peräisin aikuisen rotan maksakudoksesta. Näillä soluilla on kriittinen rooli maksan fysiologiassa ja patologiassa, erityisesti maksan fibroosin ja kirroosin prosesseissa. Maksan stellatesolut vastaavat A-vitamiinin varastoimisesta lipidipisaroihin normaaleissa fysiologisissa olosuhteissa. Maksavaurion yhteydessä ne erilaistuvat myofibroblastien kaltaisiksi soluiksi, jotka erittävät solunulkoisia matriisiproteiineja ja edistävät fibroottista vastetta. HSC-T6-solulinjaa on käytetty laajasti mallina näiden mekanismien tutkimisessa, koska se pystyy jäljittelemään aktivoituneiden maksan tähtihormonisolujen in vivo -käyttäytymistä.

HSC-T6-solut ilmentävät keskeisiä merkkiaineita, kuten α-sileälihasaktiinia (α-SMA), gliafibrillaarista happoproteiinia (GFAP) ja desmiinia, jotka viittaavat niiden myofibroblastiseen fenotyyppiin. Näillä soluilla on myös huomattava proliferatiivinen kyky ja ne reagoivat erilaisiin sytokiineihin ja kasvutekijöihin, mikä tekee niistä korvaamattoman arvokkaan välineen maksan fibroosiin liittyvien signaalireittien tutkimiseen. Tutkijat ovat käyttäneet HSC-T6-soluja tutkiakseen terapeuttisia kohteita ja toimenpiteitä, joilla pyritään lievittämään fibroosia ja edistämään maksan uudistumista. Tämän solulinjan saatavuus on siten helpottanut merkittävästi maksasairauksien ymmärtämistä ja mahdollisten hoitojen kehittämistä.

Kudos
Maksa
Synonyymit
  • HSCT6

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
HSC-T6 (Cytionin tuotenumero 305199)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0315

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Sprague Dawley
Luovuttajan ikä
Aikuiset