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HSC-T6
Tessuto
Fegato
Sinonimi
HSCT6

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HSC-T6

Cell line · Codice prodotto 305199

The HSC-T6 cell line is a well-characterized hepatic stellate cell line derived from adult rat liver tissue. These cells play a critical role in liver phy...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HSC-T6 è una linea ben caratterizzata di cellule stellate epatiche derivate da tessuto epatico di ratto adulto. Queste cellule svolgono un ruolo critico nella fisiologia e nella patologia del fegato, in particolare nei processi di fibrosi epatica e cirrosi. Le cellule stellate epatiche sono responsabili dell'immagazzinamento della vitamina A in gocce lipidiche in condizioni fisiologiche normali. In caso di lesione epatica, si trasformano in cellule simili a miofibroblasti, che secernono proteine della matrice extracellulare, contribuendo alla risposta fibrotica. La linea cellulare HSC-T6 è stata ampiamente utilizzata come modello per studiare questi meccanismi grazie alla sua capacità di imitare il comportamento in vivo delle cellule stellate epatiche attivate.

Le cellule HSC-T6 esprimono marcatori chiave come l'actina muscolare liscia α (α-SMA), la proteina acida fibrillare gliale (GFAP) e la desmina, che sono indicativi del loro fenotipo miofibroblastico. Queste cellule mostrano anche una significativa capacità proliferativa e sono reattive a varie citochine e fattori di crescita, il che le rende uno strumento prezioso per studiare le vie di segnalazione coinvolte nella fibrosi epatica. I ricercatori hanno impiegato le cellule HSC-T6 per esplorare bersagli terapeutici e interventi volti a mitigare la fibrosi e a promuovere la rigenerazione epatica. La disponibilità di questa linea cellulare ha quindi facilitato progressi significativi nella comprensione delle malattie epatiche e nello sviluppo di potenziali trattamenti.

Tessuto
Fegato
Sinonimi
  • HSCT6

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HSC-T6 (catalogo Cytion numero 305199)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0315

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Sprague Dawley
Età dei donatori
Adulti