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KHOS-240S
Gewebe
Knochen
Krankheit
Osteosarkom
Synonyme
KHOS240S

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KHOS-240S

Cell line · Artikelnummer 300433

KHOS-240S is an osteosarcoma cell line that is derived from human bone sarcoma tissue. This cell line, along with its variants, has been extensively used ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

KHOS-240S ist eine Osteosarkom-Zelllinie, die aus menschlichem Knochensarkomgewebe gewonnen wird. Diese Zelllinie und ihre Varianten wurden in der Forschung zum Osteosarkom, einem primären bösartigen Knochentumor, der vor allem Kinder und junge Erwachsene befällt, ausgiebig verwendet. Osteosarkome zeichnen sich durch die Bildung von unreifem Knochen (Osteoid) durch bösartige Zellen aus und sind für ihr aggressives Verhalten und ihr Potenzial zur frühen Metastasierung, insbesondere in die Lunge, bekannt.

Die KHOS-240S-Zelllinie ist gegen mehrere Kinase-Inhibitoren resistent, darunter solche, die auf den PI3K-Akt-mTOR-Signalweg abzielen. Diese Resistenz gegen gängige therapeutische Ziele macht KHOS-240S besonders wertvoll für die Untersuchung der Mechanismen der Arzneimittelresistenz bei Osteosarkomen und die Erforschung alternativer therapeutischer Strategien. Forscher haben diese Zelllinie zum Screening einer Vielzahl von Krebsmedikamenten und Prüfpräparaten verwendet, was zur Identifizierung von Wirkstoffen geführt hat, die möglicherweise Resistenzmechanismen überwinden könnten. Das Expressionsprofil von Genen, die mit Arzneimittelresistenz und der Biologie des Osteosarkoms in Verbindung gebracht werden, wie z. B. diejenigen, die am mTOR-Signalweg beteiligt sind, ist bei Studien mit KHOS-240S von besonderem Interesse.

Darüber hinaus wurde KHOS-240S für die Erforschung von mikroRNA-Expressionsmustern verwendet, die mit der Empfindlichkeit oder Resistenz gegen Medikamente korrelieren können. Die spezifische Resistenz dieser Zelllinie gegenüber Inhibitoren des PI3K-Akt-mTOR-Stoffwechsels stellt ein wichtiges Modell dar, um zu verstehen, wie Osteosarkome sich zielgerichteten Therapien entziehen können, und bietet eine Grundlage für die Entwicklung neuer therapeutischer Ansätze, die die Wirksamkeit der Behandlung resistenter Osteosarkom-Subtypen verbessern könnten.

Gewebe
Knochen
Krankheit
Osteosarkom
Synonyme
  • KHOS240S

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Tumorauslösend
Nein

04Bezeichner

Quellenangabe
KHOS-240S (Cytion-Katalognummer 300433)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2544

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
13 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch