Pāriet uz saturu
KHOS-240S
Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
KHOS240S

Dokumenti

KHOS-240S

Cell line · Preces numurs 300433

KHOS-240S is an osteosarcoma cell line that is derived from human bone sarcoma tissue. This cell line, along with its variants, has been extensively used ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KHOS-240S ir osteosarkomas šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka kaulu sarkomas audiem. Šī šūnu līnija kopā ar tās variantiem ir plaši izmantota pētījumos, kas vērsti uz osteosarkomu - primāro ļaundabīgo kaulu audzēju, kas pārsvarā skar bērnus un jauniešus. Osteosarkomu raksturo tas, ka ļaundabīgās šūnas veido nenobriedušu kaulu (osteoīdu), un tā ir pazīstama ar savu agresīvo uzvedību un agrīnu metastāžu veidošanās potenciālu, jo īpaši plaušās.

KHOS-240S šūnu līnija ir rezistenta pret vairākiem kināžu inhibitoriem, tostarp pret PI3K-Akt-mTOR ceļu. Šī rezistence pret izplatītiem terapeitiskiem mērķiem padara KHOS-240S īpaši vērtīgu, lai pētītu osteosarkomas rezistences pret zālēm mehānismus un alternatīvas terapeitiskās stratēģijas. Pētnieki ir izmantojuši šo šūnu līniju, lai pārbaudītu dažādas onkoloģiskas zāles un pētāmos līdzekļus, kas ir ļāvis identificēt savienojumus, kuri potenciāli varētu pārvarēt rezistences mehānismus. Pētījumos, kuros izmanto KHOS-240S, īpašu interesi izraisa ar rezistenci pret zālēm un osteosarkomas bioloģiju saistīto gēnu, piemēram, mTOR signalizācijas ceļā iesaistīto gēnu, ekspresijas profils.

Turklāt KHOS-240S ir izmantota, pētot mikro RNS ekspresijas modeļus, kas var būt saistīti ar jutību pret zālēm vai rezistenci. Šīs šūnu līnijas specifiskā rezistence pret PI3K-Akt-mTOR ceļa inhibitoriem nodrošina būtisku modeli, lai saprastu, kā osteosarkomas var izvairīties no mērķterapijas, un piedāvā pamatu jaunu terapeitisku pieeju izstrādei, kas varētu uzlabot ārstēšanas efektivitāti rezistentiem osteosarkomu apakštipiem.

Audums
Bone
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
  • KHOS240S

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
KHOS-240S (Cytion kataloga numurs 300433)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2544

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
13 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis