Přejít na obsah
KHOS-240S
Tkáň
Kost
Nemoc
Osteosarkom
Synonyma
KHOS240S

Dokumenty

KHOS-240S

Cell line · Číslo výrobku 300433

KHOS-240S is an osteosarcoma cell line that is derived from human bone sarcoma tissue. This cell line, along with its variants, has been extensively used ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

KHOS-240S je buněčná linie osteosarkomu, která je odvozena z lidské kostní sarkomové tkáně. Tato buněčná linie spolu se svými variantami byla hojně využívána ve výzkumu zaměřeném na osteosarkom, primární zhoubný kostní nádor, který postihuje převážně děti a mladé dospělé. Osteosarkom je charakterizován tvorbou nezralé kosti (osteoidu) maligními buňkami a je známý svým agresivním chováním a možností časného metastazování, zejména do plic.

Buněčná linie KHOS-240S je rezistentní vůči několika inhibitorům kináz, včetně těch, které jsou zaměřeny na dráhu PI3K-Akt-mTOR. Díky této rezistenci vůči běžným terapeutickým cílům je linie KHOS-240S obzvláště cenná pro studium mechanismů rezistence vůči lékům u osteosarkomu a zkoumání alternativních terapeutických strategií. Výzkumníci použili tuto buněčnou linii ke screeningu různých onkologických léčiv a zkoumaných látek, což vedlo k identifikaci sloučenin, které by mohly potenciálně překonat mechanismy rezistence. Ve studiích využívajících KHOS-240S je zvláště zajímavý expresní profil genů spojených s rezistencí na léky a biologií osteosarkomu, například genů zapojených do signální dráhy mTOR.

Kromě toho byl KHOS-240S využit při zkoumání vzorců exprese mikroRNA, které mohou korelovat s citlivostí nebo rezistencí na léčiva. Specifická rezistence této buněčné linie k inhibitorům dráhy PI3K-Akt-mTOR poskytuje základní model pro pochopení toho, jak se osteosarkomy mohou vyhýbat cílené léčbě, a nabízí základ pro vývoj nových terapeutických přístupů, které by mohly zvýšit účinnost léčby u rezistentních podtypů osteosarkomů.

Tkáň
Kost
Nemoc
Osteosarkom
Synonyma
  • KHOS240S

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Tumorogenní
Ne

04Identifikátory

Citace
KHOS-240S (katalogové číslo Cytion 300433)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2544

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
13 let
Etnická příslušnost
Kavkazský