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OVCAR3
Gewebe
Eierstock
Krankheit
Hochgradiges seröses Adenokarzinom der Eierstöcke
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
OVCAR-3, Ovcar-3, OVCAR.3, NIH:Ovcar-3, NIH:OVCAR3, NIH-OVCAR-3, NIHOVCAR3, OVCAR3, Ovcar3

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OVCAR3

Cell line · Artikelnummer 300307

OVCAR-3 cells are a human ovarian cancer cell line established from the malignant ascites of a 60-year-old Caucasian female patient with progressive adeno...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

OVCAR-3-Zellen sind eine menschliche Ovarialkarzinom-Zelllinie, die aus dem malignen Aszites einer 60-jährigen kaukasischen Patientin mit progressivem Adenokarzinom des Eierstocks gewonnen wurde, das gegenüber einer Behandlung mit Cyclophosphamid, Adriamycin und Cisplatin refraktär war. Ovcar-3-Zellen werden für eine Vielzahl von Studien verwendet, u. a. zur Medikamentenresistenz, insbesondere zu Biomarkern für die DNA-Schadensreaktion, zur homologen Rekombinationsreparatur und zur allgemeinen Zellzyklusdynamik, zur Krebszellbiologie und zu Genexpressionsstudien.

OVCAR-3-Zellen haben eine epitheliale Morphologie und zeichnen sich durch ihr hohes In-vitro-Wachstumspotenzial und ihre Fähigkeit zur Tumorbildung in immundefizienten Mäusen aus. Diese Zellen exprimieren mehrere Marker, die für Eierstockkrebs charakteristisch sind, und wurden ausgiebig zur Untersuchung der Biologie von Eierstockkrebs eingesetzt.

OVCAR-3-Zellen haben einen komplexen Karyotyp mit zahlreichen Chromosomenanomalien, die typisch für hochgradige seröse Ovarialkarzinome sind. Sie sind Östrogenrezeptor-positiv, was bei Ovarialkarzinom-Zelllinien relativ selten ist, und diese Eigenschaft wird in Studien genutzt, die sich mit den hormonellen Einflüssen auf das Fortschreiten und die Behandlung von Eierstockkrebs befassen.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die OVCAR3-Zelllinie einen Eckpfeiler in der Eierstockkrebsforschung darstellt, da sie ein robustes Modell zur Untersuchung des komplexen Zusammenspiels zwischen hormonellen Einflüssen, Arzneimittelresistenz und den genetischen Grundlagen des hochgradigen serösen Adenokarzinoms der Eierstöcke bietet.

Gewebe
Eierstock
Krankheit
Hochgradiges seröses Adenokarzinom der Eierstöcke
Metastasenherd
Aszites
Synonyme
  • OVCAR-3
  • Ovcar-3
  • OVCAR.3
  • NIH:Ovcar-3
  • NIH:OVCAR3
  • NIH-OVCAR-3
  • NIHOVCAR3
  • OVCAR3
  • Ovcar3

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen
Ploidie-Status
Aneuploid
MSI-Status
Stabil (MSS)
Verdopplungszeit
40 bis 60 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
OVCAR3 (Cytion Katalognummer 300307)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0465

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Androgen, Östrogen, Progesteron
Isoenzyme
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 20 % FBS und 0,01 mg/ml Humaninsulin.
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
60 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch