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OVCAR3
Tessuto
Ovaio
Malattia
Adenocarcinoma sieroso ovarico di alto grado
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
OVCAR-3, Ovcar-3, OVCAR.3, NIH:Ovcar-3, NIH:OVCAR3, NIH-OVCAR-3, NIHOVCAR3, OVCAR3, Ovcar3

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OVCAR3

Cell line · Codice prodotto 300307

OVCAR-3 cells are a human ovarian cancer cell line established from the malignant ascites of a 60-year-old Caucasian female patient with progressive adeno...

€650.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule Ovcar 3 sono una linea cellulare umana di cancro ovarico ottenuta dall'ascite maligna di una paziente caucasica di 60 anni con adenocarcinoma progressivo dell'ovaio, refrattario al trattamento con ciclofosfamide, adriamicina e cisplatino. Le cellule Ovcar 3 sono utilizzate in un'ampia gamma di studi, tra cui la resistenza ai farmaci, in particolare quelli che riguardano i biomarcatori della risposta al danno al DNA, la riparazione della ricombinazione omologa e la dinamica generale del ciclo cellulare, la biologia delle cellule tumorali e gli studi di espressione genica.

Le cellule OVCAR-3 hanno una morfologia epiteliale e sono state caratterizzate da un elevato potenziale di crescita in vitro e dalla capacità di formare tumori in topi immunodeficienti. Queste cellule esprimono diversi marcatori caratteristici del carcinoma ovarico e sono state ampiamente utilizzate per studiare la biologia del cancro ovarico.

Le cellule OVCAR-3 hanno un cariotipo complesso, con numerose anomalie cromosomiche tipiche dei carcinomi ovarici sierosi di alto grado. Sono positive al recettore degli estrogeni, cosa relativamente rara tra le linee cellulari di carcinoma ovarico, e questa caratteristica viene sfruttata negli studi incentrati sulle influenze ormonali sulla progressione e sul trattamento del carcinoma ovarico.

In sintesi, la linea cellulare OVCAR3 rappresenta una pietra miliare nella ricerca sul cancro ovarico, offrendo un solido modello per studiare la complessa interazione tra influenze ormonali, resistenza ai farmaci e basi genetiche dell'adenocarcinoma sieroso ovarico di alto grado.

Tessuto
Ovaio
Malattia
Adenocarcinoma sieroso ovarico di alto grado
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
  • OVCAR-3
  • Ovcar-3
  • OVCAR.3
  • NIH:Ovcar-3
  • NIH:OVCAR3
  • NIH-OVCAR-3
  • NIHOVCAR3
  • OVCAR3
  • Ovcar3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
Sì, in topi nudi
Stato di ploidia
Aneuploide
Stato MSI
Stabile (MSS)
Tempo di raddoppio
da 40 a 60 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
OVCAR3 (numero di catalogo Cytion 300307)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0465

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Androgeni, estrogeni, progesterone
Isoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al mezzo il 20% di FBS e 0,01 mg/mL di insulina umana.
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
60 anni
Etnia
Caucasico