Mine otse sisu juurde
3D4/21
Kude
Kopsud
Sünonüümid
IPAM 3D4/21, IPAM-WT

Dokumendid

3D4/21

Cell line · Toote number 305357

Rakuliin 3D4/21 on sigade alveolaarsete makrofaagide mudel, mida kasutatakse laialdaselt immuunvastuseid ja viirusnakkusi käsitlevates uuringutes. Need rakud on p...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin 3D4/21 on sigade alveolaarsete makrofaagide mudel, mida kasutatakse laialdaselt immuunvastuseid ja viirusnakkusi käsitlevates uuringutes. Need rakud on eriti väärtuslikud sigade hingamisteede nakkuste uurimisel, näiteks sigade gripiviiruse (SIV) ja Senecavirus A (SVA) põhjustatud nakkuste puhul. Kuna 3D4/21 rakud pärinevad alveolaarsetest makrofaagidest, on need oluline in vitro süsteem peremeesorganismi ja patogeeni vaheliste interaktsioonide uurimiseks, keskendudes immuunmehhanismidele, mida sead kasutavad hingamisteede patogeenide vastu.

3D4/21-rakke kasutatakse sageli nakkuste käigus käivitatavate molekulaarsete signaaliteede uurimiseks. Näiteks on SIV-nakkuste kontekstis uuringud näidanud, et 3D4/21-rakud käivitavad immuunvastuse erinevate tsütokiinide ja viirusetuvastusretseptorite, nagu RIG-I ja TLR7, ekspressiooni kaudu. Lisaks on need rakud olnud olulised selle kindlakstegemisel, kuidas erinevad RNA-molekulid, sealhulgas miRNA-d, lncRNA-d ja circRNA-d, aitavad kaasa regulatoorsetele võrgustikele viirusinfektsioonide ajal, pakkudes teadmisi konkurentsivõimelise endogeense RNA (ceRNA) regulatsioonimehhanismide kohta, mis aitavad kaasa viirusevastasele kaitsele. See on olnud eriti kasulik selgitamaks immuunvastuseid, mida vallandavad erinevad seagripi viiruse tüved, nagu H1N1 ja H3N2.

Lisaks on 3D4/21-rakke kasutatud autofaagia ja selle rolli uurimiseks infektsioonide kontrollimisel. Näiteks Haemophilus parasuis’e infektsiooni ajal ilmutavad need rakud autofaagilisi reaktsioone, mida reguleeritakse AMPK signaalitee kaudu. See autofaagiamekanism aitab mitte ainult kontrollida bakterite sissetungi, vaid aitab ka mõista selliste haiguste patogeneesi nagu Glässeri haigus, mis mõjutab stressis olevaid sigu. Seetõttu on 3D4/21 rakuliin jätkuvalt väärtuslik vahend immunoloogiliste ja nakkushaiguste uuringutes seoses sigade tervisega.

Kude
Kopsud
Sünonüümid
  • IPAM 3D4/21
  • IPAM-WT

02Klassifikatsioon

Organism
Siga
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Makrofaagid
Rakutüüp
Alveolaarne makrofaag

04Tunnused

Viide
3D4/21 (Cytioni katalooginumber 305357)
NCBI maksukood
9823
Cellosaurus
CVCL_0F14

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Landrace
Doonori vanus
12 nädalat