3D4/21

A linhagem celular 3D4/21 é um modelo de macrófagos alveolares suínos amplamente utilizado em estudos envolvendo respostas imunológicas e infecções virais. Essas células são particularmente valiosas para pesquisas sobre infecções respiratórias em suínos, como as causadas pelo vírus da gripe suína (SIV) e pelo Senecavirus A (SVA). Devido à sua origem em macrófagos alveolares, as células 3D4/21 servem como um sistema in vitro essencial para examinar as interações hospedeiro-patógeno, com foco nos mecanismos imunológicos que os suínos mobilizam contra patógenos respiratórios.

As células 3D4/21 são frequentemente utilizadas para explorar as vias moleculares acionadas durante as infecções. Por exemplo, no contexto das infecções por SIV, estudos demonstraram que as células 3D4/21 desencadeiam uma resposta imunológica por meio da expressão de várias citocinas e receptores de reconhecimento viral, como RIG-I e TLR7. Além disso, essas células têm sido fundamentais para identificar como diferentes moléculas de RNA, incluindo miRNAs, lncRNAs e circRNAs, contribuem para as redes regulatórias durante infecções virais, fornecendo insights sobre os mecanismos regulatórios do RNA endógeno competitivo (ceRNA) que auxiliam nas defesas antivirais. Isso tem sido particularmente útil para elucidar as respostas imunológicas desencadeadas por diferentes cepas de vírus da gripe suína, como o H1N1 e o H3N2.

Além disso, as células 3D4/21 têm sido empregadas para estudar a autofagia e seu papel no controle de infecções. Por exemplo, durante a infecção por Haemophilus parasuis, essas células exibem respostas autofágicas reguladas pela via de sinalização da AMPK. Esse mecanismo de autofagia não apenas contribui para o controle da invasão bacteriana, mas também auxilia na compreensão da patogênese de doenças como a doença de Glässer, uma condição que afeta suínos sob estresse. Como resultado, a linhagem celular 3D4/21 continua sendo uma ferramenta valiosa para pesquisas imunológicas e sobre doenças infecciosas no contexto da saúde suína.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.