Skip to content
3D4/21
Tissue
ปอด
Synonyms
IPAM 3D4/21, IPAM-WT

Documents

3D4/21

Cell line · Product number 305357

The 3D4/21 cell line is a porcine alveolar macrophage model extensively used in studies involving immune responses and viral infections. These cells are p...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ 3D4/21 เป็นแบบจำลองของแมคโครฟาจในถุงลมของสุกร ซึ่งถูกใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาเกี่ยวกับปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันและการติดเชื้อไวรัส เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับการติดเชื้อทางเดินหายใจในสุกร เช่น การติดเชื้อที่เกิดจากไวรัสไข้หวัดสุกร (SIV) และไวรัสเซเนคาไวรัส เอ (SVA) เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากมาโครฟาจในถุงลมปอด เซลล์ 3D4/21 จึงทำหน้าที่เป็นระบบทดลองในหลอดทดลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค โดยเน้นไปที่กลไกภูมิคุ้มกันที่สุกรใช้ต่อต้านเชื้อโรคทางเดินหายใจ

เซลล์ 3D4/21 มักถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาเส้นทางโมเลกุลที่ถูกกระตุ้นขึ้นระหว่างการติดเชื้อ ตัวอย่างเช่น ในบริบทของการติดเชื้อ SIV การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ 3D4/21 สร้างการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันผ่านการแสดงออกของไซโตไคน์ต่าง ๆ และตัวรับการจดจำไวรัส เช่น RIG-I และ TLR7 นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังมีบทบาทสำคัญในการระบุวิธีที่โมเลกุล RNA ต่าง ๆ รวมถึง miRNA, lncRNA และ circRNA มีส่วนร่วมในเครือข่ายการควบคุมระหว่างการติดเชื้อไวรัส ซึ่งช่วยให้เข้าใจกลไกการควบคุมของ RNA ภายในที่แข่งขันกัน (ceRNA) ที่ช่วยในการป้องกันไวรัส สิ่งนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการอธิบายการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่ถูกกระตุ้นโดยสายพันธุ์ต่าง ๆ ของไวรัสไข้หวัดหมู เช่น H1N1 และ H3N2

นอกจากนี้ เซลล์ 3D4/21 ยังถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาออโตฟาจี (autophagy) และบทบาทของมันในการควบคุมการติดเชื้อ ตัวอย่างเช่น ระหว่างการติดเชื้อ Haemophilus parasuis เซลล์เหล่านี้แสดงการตอบสนองออโตฟาจีที่ถูกควบคุมผ่านทางสัญญาณ AMPK กลไกออโตฟาจีนี้ไม่เพียงแต่ช่วยควบคุมการบุกรุกของแบคทีเรีย แต่ยังช่วยในการทำความเข้าใจกลไกการเกิดโรค เช่น โรคกลาสเซอร์ (Glässer’s disease) ซึ่งเป็นภาวะที่ส่งผลกระทบต่อสุกรที่อยู่ในภาวะเครียด ดังนั้น สายเซลล์ 3D4/21 จึงยังคงเป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันและโรคติดเชื้อในบริบทของสุขภาพสุกร

Tissue
ปอด
Synonyms
  • IPAM 3D4/21
  • IPAM-WT

02Classification

Organism
Pig
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
มาโครฟาจ
Cell type
แมคโครฟาจในถุงลมปอด

04Identifiers

Citation
3D4/21 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305357)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_0F14

05Expression and susceptibility

Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Seeding density
1–3 × 10⁴/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
สายพันธุ์ดั้งเดิม
Donor age
12 สัปดาห์