Mine otse sisu juurde
PtK1
Kude
Neerud
Sünonüümid
Pt K1 (NBL-3), NBL-3, PTK-1, PTK 1, PtK 1, PTK1, PtK1, Pt-K1, Ptk1, Potorous tridactylus Kidney 1

Dokumendid

PtK1

Cell line · Toote number 608393

PtK1 is a kidney epithelial cell line derived from the rat kangaroo, Potorous tridactylus. Known for its large, flat cells, PtK1 is widely used in microsc...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

PtK1 on neeruepiteeli rakuliin, mis on saadud rottkängurust, Potorous tridactylus'est. PtK1 on tuntud oma suurte, lamedate rakkude poolest ja seda kasutatakse laialdaselt mikroskoopias, eriti mitoosi ja kromosoomide käitumist käsitlevates uuringutes. Kromosoomide suur suurus teeb PtK1-st ideaalse mudeli kromosoomide dünaamika visualiseerimiseks rakkude jagunemise ajal, mistõttu on see populaarne valik tsütogeneetilistes ja molekulaarbioloogilistes uuringutes.

PtK1 rakke on kasutatud ka uuringutes, mis hõlmavad rakkude ühinemist ja hübriidistumist, eriti marsupiaalide ja euteriidide vahel. Neid rakke kasutatakse sageli somaatiliste rakkude geneetikas nende sobivuse tõttu ravimresistentsuse selektsiooniks. Teadlased on välja töötanud PtK1 ravimite suhtes resistentsed variandid, mis muudab need kasulikuks hübriidrakkude isoleerimiseks ja edendab meie arusaamist kromosoomide segregatsioonist ja geenide kaardistamisest liikidevahelistes hübriidides.

Immuunoperoksidaasivärvimisel on rakud keratiini suhtes positiivsed.
Kude
Neerud
Sünonüümid
  • Pt K1 (NBL-3)
  • NBL-3
  • PTK-1
  • PTK 1
  • PtK 1
  • PTK1
  • PtK1
  • Pt-K1
  • Ptk1
  • Potorous tridactylus Kidney 1

02Klassifikatsioon

Organism
Potoroo
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
PtK1 (Cytioni katalooginumber 608393)
NCBI maksukood
9310
Cellosaurus
CVCL_0489

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
Vesikulaarne stomatiit (Indiana)
Viirusresistentsus
Polioviirus 2
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Keratiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud