Pāriet uz saturu
PtK1
Audums
Nieres
Sinonīmi
Pt K1 (NBL-3), NBL-3, PTK-1, PTK 1, PtK 1, PTK1, PtK1, Pt-K1, Ptk1, Potorous tridactylus Kidney 1

Dokumenti

PtK1

Cell line · Preces numurs 608393

PtK1 is a kidney epithelial cell line derived from the rat kangaroo, Potorous tridactylus. Known for its large, flat cells, PtK1 is widely used in microsc...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

PtK1 ir nieru epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no žurku ķenguru dzimtas dzīvnieka Potorous tridactylus. PtK1 ir pazīstama ar savām lielajām, plakanajām šūnām, un to plaši izmanto mikroskopijā, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar mitozi un hromosomu uzvedību. Hromosomu lielais izmērs padara PtK1 par ideālu modeli hromosomu dinamikas vizualizēšanai šūnu dalīšanās laikā, tāpēc tā ir populāra izvēle citogenētikas un molekulārās bioloģijas pētījumos.

PtK1 šūnas ir izmantotas arī pētījumos, kas saistīti ar šūnu saplūšanu un hibridizāciju, jo īpaši starp pundurveidīgo un eitēriju sugām. Šīs šūnas bieži izmanto somatisko šūnu ģenētikā, jo tās ir piemērotas zāļu rezistences selekcijai. Pētnieki ir izstrādājuši pret zālēm rezistentus PtK1 variantus, padarot tos noderīgus hibrīdšūnu izolēšanai un uzlabojot mūsu izpratni par hromosomu segregāciju un gēnu kartēšanu starp sugu hibrīdos.

Imunoperoksidāzes krāsojumā šūnas ir pozitīvas attiecībā uz keratīnu.
Audums
Nieres
Sinonīmi
  • Pt K1 (NBL-3)
  • NBL-3
  • PTK-1
  • PTK 1
  • PtK 1
  • PTK1
  • PtK1
  • Pt-K1
  • Ptk1
  • Potorous tridactylus Kidney 1

02Klasifikācija

Organisms
Potoroo
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
PtK1 (Cytion kataloga numurs 608393)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9310
Cellosaurus
CVCL_0489

05Pazīmes un uzņēmība

Jutība pret vīrusiem
Vezikulārais stomatīts (Indiana)
Izturība pret vīrusiem
Poliovīruss 2
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Keratīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo