Siirry sisältöön
PtK1
Kudos
Munuaiset
Synonyymit
Pt K1 (NBL-3), NBL-3, PTK-1, PTK 1, PtK 1, PTK1, PtK1, Pt-K1, Ptk1, Potorous tridactylus Kidney 1

Asiakirjat

PtK1

Cell line · Tuotenumero 608393

PtK1 is a kidney epithelial cell line derived from the rat kangaroo, Potorous tridactylus. Known for its large, flat cells, PtK1 is widely used in microsc...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

PtK1 on rotakengurusta, Potorous tridactylusista, peräisin oleva munuaisten epiteelisolulinja. PtK1 tunnetaan suurista, litteistä soluistaan, ja sitä käytetään laajalti mikroskopiassa, erityisesti mitoosia ja kromosomien käyttäytymistä koskevissa tutkimuksissa. Kromosomien suuri koko tekee PtK1:stä ihanteellisen mallin kromosomidynamiikan visualisoimiseksi solunjakautumisen aikana, minkä vuoksi se on suosittu valinta sytogeneettisessä ja molekyylibiologisessa tutkimuksessa.

PtK1-soluja on hyödynnetty myös tutkimuksissa, jotka koskevat solufuusioita ja hybridisaatiota, erityisesti marsupiaali- ja eutheria-lajien välillä. Näitä soluja käytetään usein somaattisten solujen genetiikassa, koska ne soveltuvat lääkeresistenssin valintaan. Tutkijat ovat kehittäneet PtK1:stä lääkkeille vastustuskykyisiä variantteja, minkä ansiosta ne ovat käyttökelpoisia hybridisolujen eristämisessä ja edistävät ymmärrystämme kromosomien segregaatiosta ja geenikartoituksesta lajien välisissä hybrideissä.

Solut ovat positiivisia keratiinille immunoperoksidaasivärjäyksessä.
Kudos
Munuaiset
Synonyymit
  • Pt K1 (NBL-3)
  • NBL-3
  • PTK-1
  • PTK 1
  • PtK 1
  • PTK1
  • PtK1
  • Pt-K1
  • Ptk1
  • Potorous tridactylus Kidney 1

02Luokittelu

Organismi
Potoroo
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
PtK1 (Cytionin luettelonumero 608393)
NCBI-verotunnus
9310
Cellosaurus
CVCL_0489

05Ilmentyminen ja alttius

Viruksille altistuminen
Vesicular stomatitis (Indiana)
Virusten kestävyys
Poliovirus 2
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Keratiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset