Mine otse sisu juurde
THP-1
Kude
Päritolukudeks on perifeerne veri
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
THP1, THP 1, THPI, O-THP-1, Tohoku Hospital Pediatrics-1

Dokumendid

THP-1

Cell line · Toote number 300356

THP1 cells, a spontaneously immortalized monocyte-like cell line derived from the peripheral blood of a 1-year-old monocytic leukemia patient, serve as a ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

THP1 rakud, spontaanselt immortaliseeritud monotsüütide sarnane rakuliin, mis on saadud üheaastase monotsüütilise leukeemia patsiendi perifeersest verest, on kriitilise tähtsusega mudeliks immunoloogilistes ja vähiuuringutes. THP-1 monotsüütide rakuliin, mis on tuntud oma võime poolest diferentseeruda küpseteks makrofaagideks ja dendriitrakkudeks, on oluline nende immuunrakkude, sealhulgas rasvkoe makrofaagide ja M2 mononukleaarsete fagotsüütide funktsioonide ja omaduste uurimiseks in vitro.

THP-1 diferentseeritud makrofaagid on olulised monotsüütide ja makrofaagide funktsioonide, mehhanismide, signaaliradade, sealhulgas tsütokiinide aktiveerimise ja immuunsüsteemi modulatsiooni ning toitainete ja ravimite transpordi uurimisel. Lisaks saab THP-1 makrofaagid polariseerida M1- või M2-makrofaagideks, mis on olulised immuunsuse ja põletiku, kaasasündinud immuunsuse ja põletikulise reaktsiooni uuringutes.

Metaboolsete ja põletikuliste haiguste kontekstis aitavad THP-1 rakud uurida tsütokiiniprofiile, sealhulgas põletikulisi tsütokiine, ja nende mõju sellistele seisunditele nagu inimese adipotsüütide apoptoos, illustreerides põletiku ja metaboolse tervise vastastikust mõju.

THP-1 rakuliin võimaldab võrdlevaid uuringuid teiste monotsüütiliste leukeemiarakkude ja rakuliinidega, nagu U937, hõlbustades monotsüütide ja makrofaagide bioloogia sügavamat mõistmist erinevate mudelite puhul.

Kokkuvõttes on THP-1 inimese monotsüütilise leukeemia rakuliin väärtuslik vahend paljude uurimisvõimaluste jaoks, alates immuunsüsteemi keeruliste mehhanismide ja selle rolli uurimisest vähktõves kuni immuunsüsteemi moduleerimise, tsütokiinide aktiveerimise ja rakkude proliferatsiooni rakulise ja molekulaarse aluse mõistmiseni. Selle võime jäljendada inimese makrofaage ja dendriitseid rakke koos manipuleerimise lihtsuse ja kiire kasvukiirusega kinnistab selle rakuliini staatuse bioloogilistes ja meditsiinilistes uuringutes laialdaselt kasutatava rakuliinina, mis annab ülevaate immuunsuse ja põletiku rakulistest alustest, vähirakkude reaktsioonist ja terapeutilise sekkumise võimalustest.

Kude
Päritolukudeks on perifeerne veri
Haigus
Leukeemia
Rakendused
THP1 rakud on multifaktoorne mudel, mida kasutatakse immuunvastuse modelleerimisel, monotsüütide/makrofaagide diferentseerumisel, fagotsütoosi mehhanismidel, põletikuliste signaaliradade modelleerimisel, ravimite transpordi analüüsidel
Sünonüümid
  • THP1
  • THP 1
  • THPI
  • O-THP-1
  • Tohoku Hospital Pediatrics-1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
Monotsüüdid
Karyotüüp
THP-1 rakud on peaaegu diploidsed ja sisaldavad kahte geneetiliste kõrvalekalletega seotud subklooni.
Kahekordistumisaeg
Inimese THP-1 rakkude populatsiooni kahekordistumise aeg on 19 kuni 50 tundi, keskmiselt umbes 35 tundi.

04Tunnused

Viide
THP-1 (Cytioni katalooginumber 300356)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0006

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
HLA-haplotüübid: HLA-A2, -A9, -B5, -DRw1, -DRw2Fc, C3b
Isoensüümid
Inimese THP-1 rakuliin ekspresseerib madala CD4, CCR5 ja CxCR4 tasemeid, mistõttu on see oluline HIV-infektsiooni uuringutes. Siiski ekspresseerivad nad vähe CD14 ja mitte CD80, CD86, CD11b, CD11c, Mertk või CD1a, mistõttu on nad LPS-vastuse osas kehv mudel primaarsete monotsüütide jaoks.
Tooted
Lüsosüüm

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Külvitihedus
0,5 x 106 rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
1 aasta