Mine otse sisu juurde
RAW 264.7
Kude
Astsiit
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
RAW264, RAW2647, RAW264.7, RAW-264.7, Raw 264.7, Raw264.7

Dokumendid

RAW 264.7

Cell line · Toote number 400319

RAW 264.7 cells are a widely used murine macrophage cell line derived from the ascites of a male mouse with a tumor induced by the Abelson murine leukemia...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

RAW 264.7 rakud on laialdaselt kasutatav hiirte makrofaagide rakuliin, mis on saadud Abelsoni hiirte leukeemiaviiruse poolt indutseeritud kasvajaga isaste hiirte astsiidist ja mida kasutatakse tavaliselt immunoloogiliste ja nakkushaiguste uurimisel. Immortaliseeritud rakuliinina on RAW264.7 rakud peamine mudelisüsteem makrofaagide bioloogia, sealhulgas patogeenide immuunvastuse, signaaliülekande ja geeniekspressiooni uurimiseks.

RAW264.7 rakud on eriti väärtuslikud nende võime tõttu diferentseeruda makrofaagilaadseks rakuks. Neid rakke saab polarisatsiooni teel muuta M1-makrofaagideks, mis on seotud põletikulise reaktsiooniga, või M2-makrofaagideks, mis on seotud kudede taastamise ja põletikuvastaste protsessidega. See polarisatsioonivõime koos nende võimega täita olulisi makrofaagifunktsioone, nagu pinotsütoos ja fagotsütoos, rõhutab nende olulisust makrofaagide bioloogia ning immuunvastuse ja patogeenide vahelise keerulise koostoime uurimisel.

RAW 264.7 rakud on olulised immuunsüsteemi ja erinevate tegurite, sealhulgas patogeenide ja luubioloogia koostoimete uurimisel. RAW264.7 rakke saab teatud tingimustel, näiteks kokkupuutel RANKLiga (Receptor Activator of Nuclear Factor κB Ligand), diferentseerida osteoklastide sarnasteks rakkudeks, mis muudab need rakud mudeliks osteoklastide bioloogia ja luu resorptsiooni teatud aspektide uurimiseks.

RAW264.7 rakuliini reaktsioon erinevatele stiimulitele, sealhulgas püroptoosi indutseerimine, mis on põletikuline rakusurmaprotsess, mida käivitavad sellised tegurid nagu LPS (lipopolüsahhariid), on oluline põletikulise tsütokiini produktsiooni põhjustavate radade lahtimõtestamisel. Keskkonnatingimuste, näiteks rakuvälise glükoosi taseme mõju rakkude funktsioonile ja fenotüübile, annab ülevaate rakkude ainevahetusest ja põletikulise reaktsiooni võimalikust allasurumisest.

RAW264.7 rakud, mis pärinevad hiirte leukeemiast ja mida kasutatakse laialdaselt immunoloogilistes uuringutes, on oluline vahend makrofaagide bioloogia, immuunsüsteemi ja patogeenide vahelise dünaamika, osteoimmunoloogia ja põletikuvastuste mõistmisel, rõhutades nende asendamatut rolli nii biomeditsiini alus- kui ka rakendusuuringutes.

Kude
Astsiit
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
  • RAW264
  • RAW2647
  • RAW264.7
  • RAW-264.7
  • Raw 264.7
  • Raw264.7

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Rakutüüp
Makrofaagid
Kahekordistumisaeg
RAW264.7 rakkude kahekordistumisaeg ulatub 11 kuni 30 tunnini

04Tunnused

Viide
RAW 264.7 (Cytioni katalooginumber 400319)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0493

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Immunoglobuliin (Fc), komplement (C3)
Antigeeni ekspressioon
H-2d
Viirused
Rakuliini testiti ja leiti, et C-tüüpi retroviiruste pöördtranskriptaasi (RT) aktiivsus rakukultuuri supernatandis ja rakuekstraktis on positiivne. Ektromelia viirus (hiirepõletik) võib erituda.
Tooted
Lüsosüüm

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Tugevalt kleepuvad rakud, rakukraabitsate kasutamine
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
Täiskasvanud